黄连解毒汤对自发性糖尿病大鼠免疫炎症因子及损伤的影响
2013-08-21姜萍,李晓
姜 萍,李 晓
(山东中医药大学附院内科,济南 250011)
自发性糖尿病大鼠(Goto-Kakizaki diabetes prone rat,GK大鼠)是研究糖尿病的较好模型,比目前常用的链脲霉素模型更能符合人类2型糖尿病特点。在糖尿病心肌病变发展过程中,研究显示炎症因子可造成微血管及心肌的损伤[1],从中医病因病机学说可概括归纳为糖毒蕴结、热毒耗伤心络心体。黄连解毒汤是清热解毒的代表方剂,本实验采用GK大鼠主要观察黄连解毒汤对自发性糖尿病大鼠心肌炎症因子的影响及对心肌损伤的防治作用,为防治糖尿病心肌病变提供新思路和证据。
1 材料与方法
1.1 动物及分组
GK3月龄雄性大鼠30只(中国科学院上海实验动物中心,批号0005569),体质量210~300g,随机分为黄连解毒汤组、二甲双胍组、GK对照组3组。另取普通级4月龄雄性Wister大鼠10只作为正常对照组,体质量330~410g(山东大学新药评价中心提供,动物合格证号200203)。
1.2 药品及试剂
实验用药:按照黄连解毒汤原方比例制备水煎剂,浓缩至1g生药/ml(山东中医药大学附属医院制剂室完成),将二甲双胍等配制成合适的悬浊液。
试剂:核因子-κB(goat anti Nuclear factor-κB,NF-κB);酶联免疫试剂盒(美国adlitteram diagnostic laboratories INC,ADL CD A-011,LOT RT110371);细胞间黏附分子(sICAM-1)酶联免疫试剂盒(美国R&D Systems Inc,Cat No:SXR060 Lot No.0701120,中国尚柏公司代理);白介素-1(IL-1)酶联免疫试剂盒(美国R&D Systems Inc,Cat No:SXR019 Lot No.:0701119);Sun Biomedical Technology Co.,Ltd 中国尚柏公司代理);肿瘤坏死因子(TNF-α)放射免疫试剂盒;内皮素(ET-1)放射免疫试剂盒(北京普尔伟业生物科技有限公司,原北京东亚免疫技术研究所)。主要实验仪器:匀浆机(IKA-ULTRA-TURRAX T 25basic);ELx808酶标仪(美国 BIO-TEK INSTRUMENTS,INC);GMJ型全自动放射免疫γ计数器(江苏省医疗电子研究所);DDL-5冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。……
