齐 峰，邱昌龙，朱 亮，赵 舒，杨小溪

(河北联合大学中医学院，河北唐山 063000)

糖尿病累及周围神经系统可产生糖尿病周围神经病变(Diabetic Peripheral Neuropathy DPN)，而且可随病程的延长而加重，是糖尿病致残、致死的主要原因之一［1］。黄芪桂枝五物汤是我们临床常用的治疗DPN基本处方之一，且近年来因其疗效确切而屡见报道［2～5］。为进一步探明其作用效果和机制，我们开展了如下研究。

1 材料与方法

1.1 动物

8周龄健康雄性Wistar大鼠，体质量200～220g(SCXK(京)2011-0005)，由河北联合大学实验动物中心代购。

1.2 药物

黄芪桂枝五物汤:黄芪15g，桂枝 15g，白芍15g，生姜30g，大枣4枚(15g)组成，成人每日处方生药量为 90g。药材加水 300ml，浸泡 30min，煎30min，二煎加水200ml，煎20min，将2次煎汁混匀，水浴浓缩为165%(1ml含1.65g生药)的药液，4℃保存备用。所需药材从北京同仁堂唐山分部一次性购买;弥可保片(080626)500ug/，日本卫材(中国)药物有限公司。

2.2 主要试剂和仪器

链脲佐菌素(STZ):sigma公司产品(lg/瓶，批号S0130);NGF(免疫组化试剂盒)，北京博奥森生物科技公司;JT502N电子天平:上海伦捷;SZ-97自动三重纯水蒸馏器:上海亚荣生化仪器厂。

1.3 溶液配置

柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液(pH值4.2～4.5)的配置:取2.1g柠檬酸加入双蒸水100ml配成A液，取2.94g柠檬酸钠加入双蒸水100ml配成B液。用时将A、B液按1∶1.32比例混合，pH计测定pH值，调节pH=4.2～4.5，即是所需配置STZ的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液，现配现用。

1.4 实验方法

1.4.1 动物造模与分组 选取8周龄健康雄性Wisart大鼠，体质量200～220g，自然光线，不限制饮水，适应性喂养l周后禁食12h，将链脲佐菌素用0.1mmol/L柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液(pH4.2，4℃)避光条件下配成1%浓度溶液，按50mg/kg剂量左下腹腔内单次注射，72h后尾静脉取血测血糖，凡血糖≥16.7mmol/L作为糖尿病大鼠。……