北沙参多糖对甲亢型阴虚小鼠的免疫调节作用
2013-08-21荣立新刘咏梅
荣立新,鲁 爽,刘咏梅
(中国中医科学院广安门医院,北京 100053)
北沙参为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis Fr.Schmidt exMiq.)的干燥根,有养阴清肺、益胃生津的功效。研究表明,多糖是其中主要成分,可增强机体免疫功能[1,2]。本实验观察了北沙参粗多糖(GLP)[1]对阴虚小鼠的免疫调节现象,以揭示其滋阴作用的免疫调节机制,并进一步探讨中药的阴阳平衡理论。
1 材料
小牛血清(杭州四季青生物材料公司),甲状腺素(莱阳生物化学制药厂),利血平(上海医科大学红旗制药厂),PRMI 1640培养液(美国 Gibco公司),所用试剂均为分析纯。J2-MC BECKMAN高速冷冻离心机(Bechman公司),S22PC分光光度计(上海棱光技术有限公司),HHS型电热恒温水浴锅(江苏金坛市宏凯仪器厂)。昆明种雄性小鼠,6~8周龄,体质量20±2g(潍坊医学院实验动物中心,动物合格证号鲁动环字200007001号)。
2 方法与结果
2.1 GLP的提取
称取加工后的北沙参根250 g,加蒸馏水1500 ml,浸泡30 min,回流提取5 h,抽滤、滤液加95%乙醇至含醇量达50%,静置过夜,倾出上清液,离心5 min,用50%乙醇洗涤(100 ml×3),50℃烘箱烘干,过30目筛,得乳白色GLP粗制品[3]。
将制得的GLP粗品加水溶解用三氯乙酸法去游离蛋白质,然后置透析袋透析2 d,换水2次去小分子杂质,将沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤、离心,置50℃烘箱烘干,过30目筛,得白色GLP。
2.2 GLP的含量测定
用硫酸-蒽酮法测得GLP含量为63.88%。
2.3 动物分组及给药
小鼠40只随机分为5组,每组8只,分别为正常对照组[生理盐水20 ml/(kg·d)]、模型对照组、GLP高剂量组[800 mg/(kg·d)]、GLP 中剂量组[600mg/(kg·d)]、GLP 低剂量组[400 mg/(kg·d)]。每日上午除正常对照组灌服生理盐水外,其余各组均灌胃给予甲状腺片150 mg/kg和利血平1 mg/kg,下午GLP各剂量组分别灌胃给予受试药物,连续6d,各组动物实验前后各称体质量以计算体质量增加值并观察其外观变化。……
