王政润，于建霖，孔庆霞

小球藻细胞匀浆制备方法探究

王政润，于建霖，孔庆霞通信作者

（天津农学院 水产学院，天津 300392）

以普通小球藻为受试生物，研究了液氮匀浆法、研磨匀浆法、机械匀浆法、反复冻融法等4种匀浆方法的破壁效率，同时使用4种方法制备的匀浆液测定SOD活力和GSH含量，旨在筛选出破碎效率高、方便快捷且测定生理生化指标准确的方法。试验结果表明，4种方法的破碎率分别为81.43%、100.00%、92.41%、56.54%，SOD活力分别为47.06、48.58、0、25.05 U/mgprot，其中研磨匀浆法与液氮破碎法的测定结果无显著差异（＞0.05）；GSH含量分别为34.42、24.52、87.37、38.75 mgGSH/gprot，研磨匀浆法、液氮破碎法、反复冻融法的测定结果无显著差异（＞0.05），与机械匀浆法差异显著（＜0.05）。结果说明，研磨匀浆法和液氮破碎法的破碎率高，生化指标测定准确。但由于研磨匀浆法耗费人工成本过高，且无法处理大量样本，相较而言，在上述方法中采用液氮破碎法是制备小球藻细胞匀浆液最好的方法。

普通小球藻；匀浆方法；细胞破碎率；生化指标

小球藻（）属于绿藻门、绿球藻目、小球藻科，其中常见的有蛋白核小球藻（）、普通小球藻（）、海水小球藻（）等。在水生生态毒理研究中，单细胞绿藻可以直接观察细胞水平上的中毒症状，是较为理想的试验材料，常用作急性毒性测定。小球藻是应用最多的藻类之一，也是国家环保局推荐使用的藻类毒性测试的试验藻之一[1-3]。

通常，所有的毒性效应都是开始于毒物与生物分子的相互作用，在生化水平上生物标记物可以用来指示毒物造成的效应，最主要的生物标记物是各种酶[4]。……