郑亚萍，康红钰

(漯河医学高等专科学校，河南漯河 462002)

糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病最常见且最严重的并发症之一，是糖尿病致残致死的重要原因。赤芍组成的方剂具有明显保肾疗效［1］，但单方赤芍对糖尿病肾病的作用及相关机制尚少见报道。本研究通过观察赤芍对DN肾功能的影响及肾组织相应肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)和巨噬细胞ED-1表达变化，初步探讨赤芍对DN发生、发展的作用以及可能机制。

1 材料与方法

1.1 动物

体质量200～250g的雌性SD大鼠，由郑州大学医学院实验动物中心提供。

1.2 试剂

链脲佐霉素(STZ，Sigma公司产品)，赤芍注射液(漯河医专分析测试中心)，小鼠抗大鼠ED-1(巨噬细胞表面标志)，单克隆抗体(美国 Santa Cruz公司)，链酶亲和素-生物素复合物、DAB试剂盒(武汉博士德)，RT-PCR试剂盒(大连宝生物工程有限公司)。

1.3 DN模型和分组

采用左肾摘除加高糖高脂饮食加小剂量STZ 30mg/kg腹腔注射制备糖尿病肾病模型，以注射72h后血糖高于16.7mmol/L，为 DN模型建立成功［2］。大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病肾病组(DN组)、赤芍组腹腔注射30g/kg赤芍，正常对照组和糖尿病肾病组给予同剂量的生理盐水腹腔注射，每日1次，连续给药8周。

1.4 标本采集及处理

第8周末收集各组大鼠24h尿，离心后－20℃保存;动物麻醉称重，股动脉放血，离心后血清－80℃保存;取右肾去包膜后称重并于4%甲醛固定。

1.5 血尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(Ccr)及24h尿蛋白测定

用OLYMBUSAU-600全自动生化仪测测大鼠尿素氮、血肌酐，采用放免法测定24h尿微量蛋白含量。

1.6 RT-PCR 检测 TNF-α、MCP-1、ICAM-1 mRNA表达

按Trizol说明提取细胞 RNA，逆转录合成cDNA，为其以模板做PCR扩增。……