董玉玮，汤步伟，苗敬芝，曹泽虹

(徐州工程学院食品(生物)工程学院，江苏 徐州 221008)

海藻酸钠固定灵芝细胞对胞外三萜类产量的影响

董玉玮，汤步伟，苗敬芝，曹泽虹

(徐州工程学院食品(生物)工程学院，江苏 徐州 221008)

采用海藻酸钠和氯化钙对灵芝细胞进行固定，研究包埋法固定灵芝细胞的工艺条件，探讨固定化工艺对灵芝胞外三萜类产量的影响。结果表明：固定灵芝细胞的最佳工艺条件为：4.5%海藻酸钠、2.2% CaCl2、培养基pH值自然，接种40个固定化小球，28℃、110r/min培养12d，胞外三萜类产量为(49.53±1.37)×10-2mg/mL。固定化灵芝细胞较未固定细胞，具有更好的耐酸、耐碱性，长时间培养仍具有较高的产三萜类能力，回收利用次数可达5次。

灵芝；三萜类；固定化；海藻酸钠；氯化钙

被誉为“四大菌王”、“九大仙草”之一的灵芝(Ganoderma lucidum)，作为药食兼用的瑰宝，近年来，随着灵芝子实体的栽培和菌体生物发酵的生产，使得灵芝在中药、保健品、功能性食品上的应用更为普遍[1]。三萜类作为灵芝保肝、抗肿瘤的重要活性物质[2-3]，目前已分离到100多种，其产量已成为鉴定灵芝品种优劣的重要指标之一[4]。传统灵芝栽培工艺受季节和原材料的限制，子实体产量低，不能满足需要；单一的液体发酵技术虽然可以在一定程度上提高灵芝活性物质产量，但也存在投入成本高、产量不稳定等不足。固定化细胞技术是液体发酵技术与固定化酶技术的有机结合，是利用物理或化学手段将游离细胞定位于限定的空间区域并使其保持活性可以反复使用的一种技术，较液体发酵技术，可以提高微生物的催化活性，缩短生产周期，降低成本，增加产量，因而工业化生产前景广阔[5-7]。……