李 丽，房 杰，黄洁洁，付瑞燕*

(安徽农业大学茶与食品科技学院，安徽 合肥 230036)

单亲灭活德氏乳杆菌和乳酸乳球菌原生质体融合条件优化

李 丽，房 杰，黄洁洁，付瑞燕*

(安徽农业大学茶与食品科技学院，安徽 合肥 230036)

利用单亲灭活原生质体技术对德氏乳杆菌FQ菌株和乳酸乳球菌FL菌株的原生质体进行融合，考察原生质体制备、再生和融合条件的影响因素。结果表明：制备德氏乳杆菌FQ菌株原生质体最适条件为温度37℃，在含有10μg/mL变溶菌素和1mg/mL溶菌酶溶液中超声处理90min。在此条件下，原生质体再生率可达6.36%。乳酸乳球菌FL菌株添加1mg/mL甘氨酸处理后，用10mg/mL溶菌酶37℃恒温酶解90min，原生质体形成率可达99.97%。65℃处理乳酸乳球菌FL菌株原生质体120min，原生质体灭活率可达96.89%。融合实验结果表明，在PEG6000 400g/L(含0.02mol/L MgCl2和0.01mol/L CaCl2)、融合时间5min、融合温度20℃、pH6.5的条件下促融，德氏乳杆菌FQ菌株和乳酸乳球菌FL菌株原生质体的融合率可达2.72×10-6。

单亲灭活；德氏乳杆菌；乳酸乳球菌；原生质体融合

乳酸是世界上公认的三大有机酸之一，在食品、医药和生物材料等诸多领域具有良好的应用前景[1-2]。另外，乳酸经过聚合生成的直链或环状聚乳酸，是一种无毒、无刺激性、强度高、可塑性好、生物相容性优良、具有良好生物可降解性的新型生物，已引起世界各国浓厚的兴趣。因此，国内外对乳酸的生产研究非常重视[3]。

乳酸发酵的生产菌种主要为乳酸菌和根霉菌。与根霉菌发酵相比，乳酸菌发酵的产酸量高，并且对糖的利用率高，发酵不需要通氧气，动力消耗小。……