侯绍华，柏丽华，郭晓宇，贾 红，姜一曈，朱鸿飞

(中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物医学研究室，北京100193)

非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由ASF病毒(ASFV)引起猪的一种以高热、淋巴及内脏器官严重出血为特征的急性、热性、高度传染性疾病[1]。家猪和野猪是该病毒的自然宿主，家猪感染后的临床表现和病理变化以及流行病学特点类似于急性猪瘟，但病程更为急剧，致死率高达100%[2]。世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须呈报的动物疫病。

ASFV是一种有囊膜的双链DNA病毒，属于虫媒DNA病毒，其基因组全长170 kb～190 kb，中间有125 kb左右的保守区，两端为可变区，末端具有串联反转重复序列，这种序列可随机缺失或获得，造成了基因组长度的多样性[3]。p72蛋白为ASFV的核衣壳蛋白，位于细胞内病毒粒子的中层或表层。p72是一种非常保守的抗原性蛋白，对自然感染具有免疫反应原性[4]。因此，常被用作血清学诊断和免疫学检测抗原[5]。

虽然我国目前尚未发现该病，但最近几年相邻国家非洲猪瘟的爆发和流行时有发生，使得我国对该病的防控形势异常严峻。由于缺乏有效的疫苗，预防主要依赖严格的边境和口岸检疫，以阻止病毒的入侵[6]。本实验利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达p72重组蛋白，并对其抗原性进行分析，为建立安全、可靠、适合推广的非洲猪瘟血清学检测方法奠定了基础。

1 材料和方法

1.1 菌株、载体及细胞 大肠杆菌(E.coli)DH5α购自北京全式金生物技术有限公司；含ASFV p72全长基因的重组质粒pGEX-6p-p72、DH10Bac感受态、pFastBac HTa杆状病毒穿梭载体及Sf9昆虫细胞均本实验室保存。……