何玉利，刘永刚，王 刚，石文达，武嘉男，刘 鹤,2，董建国，韩梓峰,2，姜成刚，田志军，蔡雪辉*

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心，黑龙江哈尔滨150001；2.东北农业大学，黑龙江哈尔滨150001)

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine respiratory and reproductive syndrome，PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)感染引起的怀孕母猪流产、早产、死胎及仔猪呼吸系统症状的疾病。该病于1987年首次出现于美国，此后呈全球性流行，给世界养猪业造成了严重的经济损失。郭宝清等于1996年首次在国内某猪场分离到PRRSV，并命名为CH-1a株[1]。2006年，我国南方暴发了“猪高热病”，主要症状为持续性高热，具有高发病率和高死亡率。研究表明其病原为PRRSV变异株，与经典株相比，变异株在NSP2基因中存在两处共30个氨基酸的缺失[2]。

PRRSV感染可造成机体免疫器官损伤，中和抗体产生时间较晚，并在扁桃体、淋巴结等外周免疫器官中呈持续性感染[3]。本实验的目的是比较研究PRRSV变异毒株与PRRSV经典毒株对肺脏及外周免疫器官的损伤状况，为进一步探索PRRSV感染的致病机理提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 病毒株、质粒及实验动物 PRRSV变异毒株HuN4-F5和PRRSV经典毒株CH-1a-F19由本实验室保存：病毒含量均为3×105.0TCID50/mL；荧光定量RT-PCR所需的标准阳性质粒由韦天超博士提供；45头35日龄的健康断奶仔猪购自哈尔滨五方猪场。

1.2 主要试剂 总RNA抽提试剂盒购自上海生工生物工程技术服务有限公司；PRRSV N蛋白抗体检测试剂盒购自IDEXX公司；LIVTEST SUIS PRRS抗体检测试剂盒购自LSI公司；禽源反转录酶(AMV)、RNA酶抑制剂、ExTaqDNA聚合酶(Hot Start Version)购自TaKaRa公司。

1.3 实验设计 45头35日龄的健康断奶仔猪，经RT-PCR和ELISA检测均为PRRSV阴性，随机分为3组，每组15头。……