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mcr-1阳性类噬菌体质粒与F33∶A-∶B-质粒共整合形成的融合质粒的生物学特性分析

2021-04-20王亮亮王倩倩朱莹莹庞子峰朱玉喜植婵萍潘玉善刘建华贺丹丹

江西农业学报 2021年4期
关键词:耐药融合实验

王亮亮,王倩倩,朱莹莹 ,庞子峰,朱玉喜,植婵萍,潘玉善,刘建华,贺丹丹*

(1.河南农业大学,河南 郑州 450000;2.广东茂名农林科技职业技术学院,广东 茂名 525000)

F33∶A-∶B-型质粒是多重耐药质粒IncF型质粒中最为流行的亚型之一,它广泛存在于肠杆菌科细菌,尤其是大肠杆菌中,是介导fosA3、blaCTX-Ms和rmtB等耐药基因快速传播的主要载体[1-3]。F33∶A-∶B-型质粒除了能够借助IS26和IS1294元件捕获和传播抗性基因外,还能够获得IncN1、IncI1、IncR和IncX1型质粒的一些片段成为多复制子质粒[3]。本课题组在研究猪源大肠杆菌中mcr-1的水平转移能力时,首次发现在接合过程中,F33∶A-∶B-型质粒pD72-F33捕获了大约96 kb的mcr-1阳性类噬菌体质粒pD72-mcr-1形成融合质粒pD72C;序列分析发现,其质粒融合机制是pD72-F33上1个拷贝的IS26攻击pD72-mcr-1上8 bp的目标位点(CAGCATTT)[4]。

质粒介导的粘菌素耐药基因mcr-1已经成为全球关注的重点。自2015年mcr-1被首次报道后,该基因在世界范围内不同来源的不同菌种中广泛出现[5-7]。不同的mcr-1阳性不相容群质粒不断被报道,尤其是较流行的IncI2、IncX4和 IncHI2型质粒,它们所具有的较高的稳定性和适应性优势对mcr-1的快速传播起到重要作用[8-10]。除了可接合性质粒,Tn6330 (ISApl1-mcr-1-ISApl1)与mcr-1的快速传播密切相关,Tn6330能够通过形成环形中间体形式促使mcr-1插入到其它细菌的染色体或质粒的TA富集区[11-14]。目前报道的mcr-1阳性类噬菌体质粒具有较高的核酸序列同源性,其中大多数不具有自身转移性,因此这类质粒对mcr-1的快速水平传播作用具有局限性[4]。本研究中的mcr-1阳性类噬菌体质粒pD72-mcr-1具有不可接合性,然而,可接合性F33∶A-∶B-型质粒与之融合后的共整合质粒具有可接合性,这暗示F33∶A-∶B-型质粒能够作为1个接合辅助质粒提供给不可接合质粒的接合转移能力,进而促使mcr-1的快速传播[4]。……

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