唐 蕾，董晓璇，李珍爱，孙慧慧，杨瑞金，毛忠贵，*

(1.江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡 214122;

2.江南大学食品学院，江苏无锡 214122)

产β-半乳糖苷酶的节杆菌诱变选育及培养基优化

唐 蕾1，董晓璇1，李珍爱1，孙慧慧1，杨瑞金2，毛忠贵1，*

(1.江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡 214122;

2.江南大学食品学院，江苏无锡 214122)

酶法合成乳果糖需要使用同时具备水解和转苷活力的β－半乳糖苷酶为催化剂。采用物理诱变，培养基优化手段，以提高细菌产该类β－半乳糖苷酶的能力为目的，自然筛选获得的具有转苷能力的节杆菌Arthrobacter sp.，经紫外线照射处理，采用5－溴－4－氯－3－吲哚－β－D－半乳糖苷(X－gal)为平板筛选显色剂，加之摇瓶发酵筛选，得到8株产酶水平明显提高的诱变株，其中Arthrobacter sp.M2酶活力较野生株提高了89%，传代5次酶活基本稳定。采用正交实验优化产酶培养基，结果表明:在乳糖浓度为10g/L，玉米浆浓度为22g/L，Fe3+浓度为1.5mmol/L时效果最佳，酶活水平进一步提高了113%。紫外诱变和培养基优化有效地提高了节杆菌产β－半乳糖苷酶的水平。

节杆菌，紫外诱变，β－半乳糖苷酶

乳果糖是由半乳糖和果糖以β－1，4－糖苷键结合而成的二糖，它可以促进双歧杆菌增殖，具有调整肠道菌群平衡，治疗肝性脑病、降低内毒素、预防结肠息肉术后复发等功效，因而已被很多国家应用于药物和功能性食品中［1－3］。目前乳果糖的生产有化学合成与生物转化两种。化学合成主要是用碱液处理将乳糖异构化，其缺点在于生产过程中产生的有色副产物难以去除，造成分离纯化成本高，而且碱液对乳果糖的降解降低了产量［4－6］。……