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反相高效液相色谱法测定白芷提取分离物中欧前胡素含量

2011-06-27胡大强侯丽娜孟德胜

中国药业 2011年15期

胡大强,侯丽娜,孟德胜,陈 亮,徐 靖

白芷为伞形科植物白芷 Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.的干燥根,味辛,性温,归肺、胃、大肠经,芳香升散,有祛病除湿、排脓生肌、活血止痛、抗炎、抑制病原微生物、抗肿瘤、保肝等多种药理活性,近年来发现其具有清除自由基、增白及治疗白癜风的作用。白芷的主要有效成分为香豆素类化合物,其中欧前胡素的含量通常采用薄层色谱法测定。在白芷经乙醇提取、大孔吸附树脂分离后得到主要含欧前胡素的乙醇溶液基础上,笔者采用高效液相色谱法测定其中欧前胡素的含量,现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1200 LC型高效液相色谱仪,包括G 1329 A标准型自动进样器、G 1314 B型VWD检测器(美国安捷伦科技有限公司)。欧前胡素对照品(中国药品生物制品检定所,批号为110826-200712);白芷(太极集团重庆中药饮片厂有限公司,批号为090212);甲醇(分析纯,重庆川东化工有限公司,批号为0081104);甲醇(色谱纯,西班牙Scharlau Chemie S.A.公司);药用乙醇(四川金鹰实业有限公司,批号为090209)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[1-2]

色谱柱:Zorbax Eclipse XDB -C18柱(150 mm ×4.6 mm,7μm);流动相:0~6 min甲醇-水(65∶35),6~15 min甲醇-水(55∶45),15~25 min甲醇-水(65∶35);流速:1 mL/min;检测波长:302 nm;柱温:室温;进样量:20μL;理论板数为3 600。色谱图见图1。

2.2 溶液制备[3-4]

乙醇回流提取白芷总香豆素后,经大孔吸附树脂柱分离得到欧前胡素含量较高的供试品溶液,按此方法制备供试品溶液3批。精密称取欧前胡素对照品0.033 g,置10 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀。取上述溶液1.0 mL,置50 mL容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,得质量浓度为660μg/mL的对照品贮备液。

图1 高效液相色谱图

2.3 方法学考察

线性关系考察:分别精密吸取2.2项下对照品贮备液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL,分别置于 10 mL 容量瓶中,甲醇定容至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤后,按2.1项下色谱条件测定。……

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