张伟国, 钱和

(1.江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122;2.江南大学生物工程学院,江苏无锡 214122;3.江南大学食品学院,江苏无锡 214122)

L-缬氨酸高产菌诱变育种的研究

张伟国1,2, 钱和3

(1.江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122;2.江南大学生物工程学院,江苏无锡 214122;3.江南大学食品学院,江苏无锡 214122)

以黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)L-缬氨酸产生菌XQ-2为出发菌株,经硫酸二乙酯(DES)和亚硝基胍(N TG)逐级诱变处理,氨基酸结构类似物α-氨基丁酸(α-AB)、2-噻唑丙氨酸(2-TA)和α-氨基-β-羟基戊酸(AHV)定向筛选,获得一株L-缬氨酸高产菌 XQ-8(Leul(-ABhr2-TAhrA HVhr)。在以135 g/L葡萄糖为碳源和50 g/L硫酸铵为氮源的培养基中摇瓶发酵72 h,产酸达64～66 g/L。

L-缬氨酸;诱变育种;黄色短杆菌

L-缬氨酸是人体8种必需氨基酸之一,同时又是3种支链氨基酸之一,因其特殊的结构和功能在人类生命代谢中占有特别重要的地位,可广泛应用于食品和医药等方面,但由于其生产成本较高,价格较贵,目前主要用于配制复合氨基酸制剂,特别是应用于高支链氨基酸输液(如3H输液等)和口服液(肝安干糖浆等)。最近,人们发现L-缬氨酸是合成一种治疗高血压的特效药——缬沙坦的重要中间体,其年消耗量猛增到数千吨。

目前,国际上生产L-缬氨酸均采用发酵法。日本的松琦氏选育的厌气杆菌在100 g/L的葡萄糖培养基中产酸达15 g/L[1];Tsuchicla等选育的乳糖发酵短杆菌摇瓶产酸达31g/L[2];日本协和公司的L-缬氨酸产酸水平达40～50 g/L[3]。中国科学院微生物研究所于1975年在国内首次报道了L-缬氨酸产生菌北京棒杆菌突变株AS1.586的选育,产酸为26 g/L[4]。……