黄莉莉,于 爽,李秋红,李廷利

(黑龙江中医药大学中药药理教研室,黑龙江哈尔滨 150040)

柴胡加龙骨牡蛎汤为张仲景《伤寒论》中为伤寒八九日,误用攻下致变证而设。本证以“胸满烦惊,小便不利,谵语,一身尽重,不可转侧者”为主要临床表现,以病邪内陷、弥漫全身、表里俱病、虚实错杂而至少阳枢机不利为主要病机,包括了现代医学的神经系统、循环系统的部分疾病,以及某些精神疾病的临床表现。近些年临床报道,柴胡加龙骨牡蛎汤在治疗更年期综合征以及睡眠障碍等方面取得了很好的疗效[1～3]。为此,本实验采用大鼠皮层脑电图描记技术,研究柴胡加龙骨牡蛎汤对去卵巢大鼠睡眠时相的影响,以期为中医临床应用提供现代药理基础。

1 材料与方法

1.1 药物

柴胡加龙骨牡蛎汤各药材均购自哈药集团人民同泰药店,并经黑龙江中医药大学生药学教研室鉴定,分别为人参 Panax Ginseng C.A.Mey.;肉桂Cinnamomum casia Presl(嫩枝);半夏 Pinellia temate(Thunb.)Breit.r;茯苓 Poria c0o0s(Schw.)Wolf.;黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi;柴胡 Bupleurum chinense IX;.;掌叶大黄 Rheum palmatum L.;姜Zingiber officinale Rose.(新鲜根茎);枣 Ziziphus juiuba Mil1.的干燥成熟(果实);长牡蛎等贝壳Concha Ostreae;三趾马等骨骼化石 Os Draconis。各药按原方用量比例(除大黄)加适量的水浸泡 2h,煮沸 30min过滤,将滤渣再加适量水煎煮 10min后,加入大黄共煎 10min,合并 2次滤液,浓缩至每毫升煎液相当于原药材 1g。

1.2 动物

Wistar大鼠,雌性,体重 200g～ 240g,黑龙江中医药大学实验动物中心提供,许可证号黑动字第P00101006。

1.3 仪器

16道生理信号记录仪(美国 Stoelting公司),大鼠脑立体定位仪(美国 Stoelting公司),有机玻璃笼(自制),恒温恒湿自动光控电子屏蔽室。

1.4 方法

1.4.1 手术操作 戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(40mg/kg),脑立体定位仪固定,头部剪毛与消毒后,剪开头部皮肤,分别于冠状缝前 1mm及人字缝前 1mm与颅骨中线右侧旁开 1mm交叉点处,用特制的止血钳夹住 2个螺丝钉入颅骨内,使之与硬脑膜接触,但不穿透硬脑膜,为皮层电极,用于记录脑电。在两侧颈肌内分别插入银丝电极以记录肌电,4个电极分别焊至 4线微型插座上,借牙科水泥固定于颅骨上[5],同时无菌操作行双侧卵巢切除术[6]。假手术组安装电极后仅切除约 1g重脂肪,不切除卵巢。术后放在特制的有机玻璃筒内单笼饲养,去卵巢大鼠 3d后进行阴道涂片,连续 5d,以证明去势是否彻底。各组大鼠每天保证明暗交替 12h。

1.4.2 实验步骤 实验分为 3组,每组 8只,分别为手术组、假手术组和给药组。手术组和给药组为筛选合格的埋好记录电极的去卵巢大鼠。术后1周,给药组按 10g/kg(生药量)的剂量灌胃给予柴胡加龙骨牡蛎汤,手术组和假手术组灌胃给予等容量蒸馏水,共 7d。末次给药 30min后,头部的记录电极通过微型插座和连接线连接到 16道生理信号记录仪上,记录脑电和肌电(每日 9∶00～17∶00间进行,计算机自动连续记录 8h)。

2 结果

柴胡加龙骨牡蛎汤对自由活动去卵巢大鼠睡眠时相的影响

表1 柴胡加龙骨牡蛎汤对自由活动去卵巢大鼠睡眠时相的影响(±s,n=8)

表1 柴胡加龙骨牡蛎汤对自由活动去卵巢大鼠睡眠时相的影响(±s,n=8)

注:与手术组比较:＊P<0.05

组别SWS1(min)SWS2(min)REM(min) WAKE(min)手 术 组 153.33±42.39 27.83±9.83 3.83±4.67 295.00±46.42假 手 术 组 153.41±40.83 49.24±11.42＊ 2.71±2.13 274.63±38.7柴胡加龙骨牡蛎汤 125.25±34.43 82.22±39.56＊ 2.11±1.22 270.42±65.80

表1显示,去卵巢大鼠与假手术组比较,SWS2明显缩短,柴胡加龙骨牡蛎汤灌胃 7d后能延长去卵巢大鼠 SWS2,对 SWS1和 REM没有明显影响。

3 讨论

围绝经期综合征是指妇女在绝经前后,由于卵巢功能退行性改变、雌激素水平低下、神经内分泌功能失调、免疫功能下降所导致的以植物神经系统功能紊乱为主并伴有心理症状的一组证候群。主要症状按系统分为精神神经系统症状、血管舒缩失调症状、泌尿系统、生殖道及第二性征改变等[7]。

目前西医治疗上主要有激素替代法和以镇静催眠药作为主要治疗药物,同时配合非药物治疗(如睡眠卫生教育、光照治疗、心理和认知行为治疗)等疗法。镇静安眠药物作用特点在于使失眠者入睡快,浅睡眠时间延长,中间不易醒,但都(95%以上)程度不等地缩短了 SWS2和 REMS睡眠,从而产生了严重的不良反应,如宿醉、耐受性及依赖型等,使其应用受到限制。随着激素替代治疗使用的不断增加,其副作用受到越来越多的重视,如诱发乳腺癌、子宫内膜癌、肝肾功能异常等风险增加。

近年来,许多医家以治疗主症睡眠障碍为主,采用中药及复方治疗围绝经期综合征均取得了满意的临床疗效,且副作用少,故中医药治疗本病已成为关注的焦点。因此,以治疗睡眠障碍为切入点,对传统的中医药进行挖掘研究将对围绝经期综合征的治疗提供有效药物。近些年临床报道,柴胡加龙骨牡蛎汤在治疗更年期综合征以及睡眠障碍等方面取得了很好的疗效。

本实验采用大鼠皮层脑电图描记技术,首先对去卵巢大鼠的脑电图进行描记。结果发现,去卵巢大鼠在睡眠时相上表现为 SWS2明显缩短。SWS2在整个睡眠时相中称为慢波睡眠深睡期,是最重要的睡眠成分。据此,国内学者提出新型催眠药物应选择性地延长慢波睡眠深睡期,同时保证REM正常比例[8]。国内学者还研究发现[9],慢波失眠者有深睡眠减少甚至缺乏,REM(快动眼睡眠)活动度和密度低改变等。多项围绝经期综合征流行病学调查表明,我国围绝经期症状中尤以睡眠障碍发生率高[10]。本研究结果表明,去卵巢大鼠与假手术组在睡眠时相上表现为 SWS2明显缩短,与围绝经期患者主要症状为睡眠障碍相一致,从脑电图方面为围绝经期患者的临床表现提供了依据。柴胡加龙骨牡蛎汤灌胃 7d后能延长去卵巢大鼠 SWS2,对 SWS1和 REM没有明显影响。此研究结果在一定程度上明确了柴胡加龙骨牡蛎汤改善由于卵巢衰退而引起的睡眠障碍的药理作用,为中医临床应用其治疗更年期综合征以及睡眠障碍提供了现代药理基础。

[1]彭光超.柴胡加龙骨牡蛎汤加减治疗更年期综合征 385例[J].河南中医,2006,26(9):13-14.

[2]徐奕佳,卢瑜卿.柴胡加龙骨牡蛎汤加减治疗更年期精神病50例临床观察[J].中医药临床杂志,2006,17(1):32-33.

[3]王普京.柴胡加龙骨牡蛎汤加减治疗更年期失眠的疗效分析[J].中国中医基础医学杂志,2006,12(5):369.

[4]李铁成,刘茂祥.柴胡加龙骨牡蛎汤治疗失眠症 40例临床观察[J].中国中医基础医学杂志,2008,24(3):24.

[5]程化奇.大鼠更年期实验模型研究[J].上海实验动物科学,1993,13(4):192.

[6]Depoortere H.Some aspect of the polygraphic studies on sleepwakefulness cycle in rat.Waking and Sleep,1980,4(1):47-62.

[7]陆洪波,扬晓钊,黄永兴.围绝经期综合征流行病学研究现状[J].广西医学,2001,23(5):1131-1134.

[8]库宝善.催眠药物开发新构想[J].生理科学进展,1992,23:107-109.

[9]李冲,贾福军,杜好瑞,等.失眠患者的多导睡眠图研究[J].中华精神科杂志,1999,32(1):35.

[10]闫雪,付桂玲,刘艳骄.女性失眠患者临床特征的调查研究[J].中国中医基础医学杂志,2006,12(11):855-857.