中图分类号：S682；S432 文献标识码：A 文章编号：1006-060X（2025）06-0090-06

引用格式：，等.湖南金丝皇菊花叶病害病原物鉴定[J].湖南农业科学，2025（6）：90-95.DOI：10.16498/j.cnki.hnnykx.2025.006.016

Identification of Pathogens Causing Mosaic Disease of Chrysanthemum morifolium 'Jinsi Huangju' in Hunan Province

HOU Jia-yi ^1，2，3 ，LI Ling'，CHEN Xue-feng1，WU Bo-shun1，XIANG Li-li1，2³，YU Xiao-ying ^1，2，3 ， XU Lu12.：

（1.Colegeoficuue，aricalUstsh，;.ndropalQality andUtilizationeinoeahntegh8C;3esnbratorygsha）

Abstract：To identifythe pathogens causingtypical mosaicdiseaseofChrysanthemum morifolium'Jinsi Huangju’inHunan，we colected the leaves withmosaic diseasesymptoms from the Hongcichrysanthemum plantingbase.RT-PCRamplification，enzymelinkedimmunosorbentassay（ELISA），andnegativestaining electronmicroscopywereemployedtoidentifythepathogensithee dimensions ofucleotide sequence，morphology，and protein specificity.RT-PCRamplifcationofthediseased leaves producedtwo targetbands，which wereat thesizessimilartothetarget gene lengthsofchrysanthemum chlorotic motleviroid（CChMVdand chrysanthemum virus B（CVB）.ELISA confirmed the presenceof CVB-specific protein in the diseased leaves.Negative staining of the suspension preparedwiththediseasedleavesrevealedpathogencomponentintwodiferentshapes，whichweresimilarto morphologicalstructureofCChMVdandCVB.Thephylogenetic treeshowcasedthattheisolate（viroid）fromHunansharedthesame clade with four reference isolates （e.g.， CChMVd，FJ647546.1） from Spain， with the sequence similarityof 87% .In addition， the isolate （virus）fromHunansharedthe sameclade withthat fromNanjing （CVB，JQ904595.1），withthe sequencesimilarityof 100% .In conclusion，CChdandCBarethepathogenscausingmosaicdiseaseofC.morifoliumJinsiHuangju'inHunan，andteobied infection of the two viruses leads to the occurrence of this disease.

Key Words：Chrysanthemum morifolium'Jinsi Huangju'; virus identification; CChMVd; CVB; RT-PCR

金丝皇菊（Chrysanthemummorifolium'JinsiHuangju'）为药食兼用型大花茶菊，不仅富含黄酮类、多糖和氨基酸等多种药用活性成分，还极具观赏价值[1-3]。随着国家乡村振兴战略的深人实施，金丝皇菊在湖南部分县域地区已经实现了规模化种植，成为当地农业特色支柱产业。由于金丝皇菊的规模化种植主要依赖无性繁殖，易导致病毒和类病毒积累，引发花叶、褪绿斑、分枝减少、不现蕾和不开花等症状，严重时整株枯死，造成种质退化和产量下降等问题[4-5]。菊花极易受到病毒和类病毒侵染，目前全球已报道的侵染菊花的病原体超过20种，包括菊花B病毒[ChrysanthemumvirusB（CVB）]、烟草花叶病毒[Tobaccomosaicvirus（TMV）]、番茄花叶病毒[Tomatomosaicvirus（ToMV]、番茄不孕病毒[Tomatoaspermyvirus（TAV）]、菊花褪绿斑驳类病毒[Chrysan-themumchloroticmottleviroid（CChMVd）]、菊花矮化类病毒[Chrysanthemumstuntviroid（CSVd）]等。这些病原体引发的病害在我国多个菊花主产区频繁发生，严重制约着产业的可持续发展[。近年来，湖南部分种植区的金丝皇菊出现了花叶症状，导致产区菊花产量和品质降低，而关于其病原物鉴定的研究尚未见报道。因此，采用高效、快速的检测方法确定湖南金丝皇菊花叶症状的病原物种类，对当地菊花病害的精准防控、产量品质提升及抗病种质筛选均具有重要意义[7-9]。当前，植物病毒及类病毒病原鉴定方法主要包括逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）[10-12]、实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）[13]和酶联免疫吸附法（ELISA）[14]等。其中，qRT-PCR需使用精密荧光定量PCR仪，存在设备成本投人高、RNA提取技术要求高和操作复杂等问题；……