刘凯月，王湘闽，陈肖英，赖志勇

深圳市深业航天食品与环境检测科技有限公司（深圳 518000）

石斛属（DendrobiumSW.）为兰科第二大属，种质资源丰富。道家经典著作《道藏》将其列为“中华九大仙草之首”。我国的石斛属植物有74种2变种[1]，其中药用石斛就有39种，含有多种药效成分，是一种“药食同源”的植物[2]。

传统石斛质量的评价多以感官和形态为主，即以“茎粗、质重、嚼之粘牙、味苦、无渣”作为评价石斛品质的主要标准，但这一方法并不能完全体现其内在品质的优劣。2015版《中国药典》规定了铁皮石斛多糖和醇溶性浸出物含量标准，以此作为评价铁皮石斛品质的重要标准之一。随着现代研究技术的快速发展，石斛的化学成分[3-5]和药理活性[6-9]的研究越来越广泛。但是在以往的研究中，对不同石斛品种间比较的研究较多，对不同栽培方式的石斛品质影响比较少，也没有形成系统的石斛栽培方式对质量影响的评价体系。因此，此次试验针对常规种植的铁皮石斛枫斗、岩壁野化铁皮石斛枫斗、贴树仿野生铁皮石斛枫斗及其花茶不同栽培方式，测定其主要活性成分含量并分析多糖，进行差异性比较。以便为不同栽培方式石斛及其花茶的质量评价以及开发利用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用到的铁皮石斛及花茶样品均来自同一公司。

1.2 试剂和仪器

葡萄糖对照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；甘露糖对照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；芦丁对照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；乙醇（AR，国药集团试剂有限公司）；苯酚（AR，广州化学试剂厂）；硫酸（AR，国药集团试剂有限公司）；乙腈（HPLC，CNW）；乙酸铵（HPLC，CNW）。

SX2-4-10TP马弗炉（上海一恒科学仪器有限公司）；HWS24电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）；FA1104天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；UV-1800PC紫外分光光度计（上海翱艺科学仪器有限公司）；Ultimate 3000液相色谱仪（Thermo fisher）。

1.3 活性成分测定

1.3.1 浸出物含量测定

浸出物的测定参考2015年版《中国药典》[10]中的热浸法。

1.3.2 多糖含量测定

多糖含量测定参考2015年版《中国药典》[10]中的方法。

1.3.3 总黄酮含量的测定

总黄酮含量的测定参考SN/T 4592—2016《出口食品中总黄酮的测定》[11]。

1.4 多糖结构的测定

1.4.1 甘露糖与葡萄糖峰面积比测定

取不同石斛样品多糖水解液，采用液相色谱仪进行甘露糖与葡萄糖的峰面积比测定。

液相色谱仪条件：色谱柱：C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；柱温：30 ℃；流速：1.0 mL/min；流动相：乙腈∶0.02 mol/L的乙酸铵溶液（20∶80，V/V）；检测器：二极管阵列检测器；检测波长：250 nm。记录甘露糖色谱峰与葡萄糖色谱峰，并计算甘露糖的峰面积与葡萄糖峰面积的比值。

2 结果与分析

2.1 不同栽培方式石斛枫斗及花茶的浸出物含量分析

浸出物含量在一定程度上可以反映药材质量，2015年《中华人民共和国药典》将其作为评价石斛品质的标准之一。从表1可以看出，三种不同方式栽培的铁皮石斛枫斗，醇溶浸出物存在差异，其中岩壁野化铁皮枫斗醇溶浸出物含量最高，该常规养殖的铁皮石斛试样醇溶浸出物含量最低，2015版《中国药典》规定，铁皮石斛中醇溶性浸出物含量不得低于6.5%。故该供试品铁皮石斛枫斗不符合《中国药典》规定。不同栽培方式石斛枫斗的醇溶性浸出物含量从大到小排序为岩壁野化铁皮石斛枫斗＞贴树仿野生铁皮石斛枫斗＞铁皮石斛枫斗。

从表1可以看出，三种不同方式栽培的铁皮石斛花茶，水溶浸出物差异不大，不同栽培方式石斛花茶的水溶性浸出物含量从大到小排序为岩壁野化铁皮石斛花茶＞铁皮石斛花茶＞贴树仿野生铁皮石斛花茶。

表1 不同栽培方式石斛浸出物含量表

2.2 不同栽培方式石斛枫斗及花茶的多糖含量分析

石斛中所含有的大量多糖物质是石斛的主要功能成分之一，在调节免疫力、降血糖、抗氧化、抗衰老等方面发挥着重要的作用。从表2可以看出，三种不同方式栽培的铁皮石斛，多糖存在差异，其中树栽仿野生铁皮枫斗多糖含量最高，岩壁野化铁皮枫斗试样多糖含量最低。不同栽培方式石斛枫斗的多糖含量从大到小排序为贴树仿野生铁皮石斛枫斗＞铁皮石斛枫斗＞岩壁野化铁皮石斛枫斗。

表2 不同栽培方式石斛枫斗及花茶的多糖含量表

从表2可以看出，三种不同方式栽培的铁皮石斛花茶，多糖含量存在差异，不同栽培方式石斛花茶的多糖含量从大到小排序为：贴树仿野生铁皮石斛花茶＞铁皮石斛花茶＞岩壁野化铁皮石斛花茶。

2.3 不同栽培方式石斛的甘露糖与葡萄糖峰面积比分析

如表3所示，不同品种石斛多糖的甘露糖和葡萄糖含量差异不大。《中国药典》规定，铁皮石斛多糖的甘露糖与葡萄糖峰面积比应在2.4～8.0之间。表3显示，3种石斛样品甘露糖与葡萄糖峰面积比值均不高，但符合药典规定。

表3 不同栽培方式石斛的甘露糖与葡萄糖峰面积比

2.4 不同栽培方式石斛花茶的黄酮含量分析

研究表明，石斛中含有的黄酮类物质具有良好的抗氧化[12]作用和抗肿瘤[13]作用。从表4可以看出，3种石斛花茶样品的黄酮含量在0.61%～1.08%之间，其中岩壁野化铁皮石斛花茶的黄酮含量（1.08%）最高，贴树仿野生铁皮石斛花茶黄酮含量（0.61%）最低，均高于不同品种铁皮石斛中黄酮含量[14]。

表4 不同栽培方式石斛花茶的黄酮含量

3 结论

对不同栽培方式石斛及花茶活性成分含量和多糖进行比较分析，可知不同栽培方式间品质差异明显。因石斛中活性成分复杂多样，故不能以单个成分含量的高低来判断其品质的好坏。水溶性浸出物中含有的活性物质主要是水溶性多糖，醇溶性浸出物中的活性物质有黄酮和石斛碱等。生岩壁野化铁皮枫斗醇溶浸出物较高但其多糖含量并不高，所以可以推断浸出物中除了含有以往研究中的一些活性成分外，还有其他成分的存在。浸出物含量的高低并不能绝对代表石斛品质的优劣。研究表明，多糖和黄酮含量常被用作评价石斛品质的重要标准，树栽仿野生、岩壁野化栽培斗均优于常规栽培铁皮石斛，其花茶与其保持一致，且花茶的黄酮含量远远高于石斛的黄酮含量，抗氧化效果更好。