郁福乾，宋莎莎，路 燕，章礼久

药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)是指由药物和(或)其代谢产物引起的肝脏损伤，其发病率近年来呈上升趋势，目前已是中国非感染性肝病的第2大病种[1]。其中以对乙酰氨基酚(acetaminophen，APAP)过量诱导的急性肝衰竭(acute liver failure，ALF)最为常见[2-3]。在肝脏损伤及修复再生过程中，炎症反应起至关重要的作用。炎症诱导的再生主要由炎症细胞释放的各种细胞因子和生长因子调控，目前研究较多的促炎细胞因子是白细胞介素(interleukin,IL)-6和肿瘤坏死因子 (tumor necrosis factor,TNF)-α[4]。体内研究表明IL-6和TNF-α在炎症反应早期介导肝损伤，但在后期能够促进肝脏再生[5-6]。该研究旨在通过体外实验探讨IL-6在APAP所致急性肝损伤(acute liver injury,ALI)后肝再生过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 细胞株与主要试剂小鼠正常肝细胞AML12 细胞系由安徽医科大学毒理学实验室赠予；APAP购自美国MedChemExpress公司；CCK-8试剂盒购自武汉Elabscience公司；IL-6中和抗体、地塞米松购自美国Thermo公司；磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)抗体购自美国Santa Cruz公司；信号传导与转录激活因子3(STAT3)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、肝细胞生长因子(HGF)抗体均购自美国CST公司；IL-6 ELISA试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司；特异性引物购自上海生工生物公司；PCR相关试剂购自上海新贝生物有限公司。

1.2 方法

1.2.1细胞培养 将小鼠正常肝细胞AML12培养在DMEM/F-12 培养基[含10% 胎牛血清、1%胰岛素-转铁蛋白-硒 (insulin-transferrin-selenium,ITS)、0.5‰地塞米松及1%青-链霉素]中，37 ℃、5%CO2培养箱中进行孵育，培养1～2 d细胞融合达85%左右时传代。

1.2.2CCK-8实验 取对数生长期AML12细胞，细胞重悬后调整细胞密度为7.5×104个/ml，96孔板每孔加入……