谢佩玲，张俐娜，何娜，南开辉

外伤性视神经病变（TON）是颅脑外伤常见合并症状之一，在交通、高空坠落等事故中多见[1]。目前临床对于间接性TON治疗尚未达成共识，推荐治疗方法有静脉注射大剂量糖皮质激素和经颅或经筛窦视神经管减压术，但神经损伤修复再生治疗效果不稳定，治疗效果不佳主要与视网膜神经节细胞（RGCs）存活数量以及轴突再生关系密切[2-3]。为改善TON患者的治疗效果，研究者们致力于探索其他治疗手段如基因治疗、干细胞治疗用于视神经损伤修复再生，干细胞用于中枢神经损伤治疗作用在不同疾病模型研究中分别得到了证实[4-5]，然而，干细胞在TON 中的具体作用及其机制研究相对较少。本研究选择大鼠视神经夹伤模型，经由玻璃体腔内注射骨髓间充质细胞（BMSC），研究其对RGCs的保护及其轴突再生作用。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 材料 细胞培养基DMEM/F 12（1∶1）（1X）、胎牛血清、胰酶（0.25% trypsin-EDTA）等购自美国Gibco 公司，死活染色试剂盒（Live/dead Viability assay）购自美国Invitrogen 公司，光学相干断层扫描仪（OCT）购自美国Tissue-Tek 公司，Triton X-100 购自北京Solarbio 公司，氧氟沙星软膏购自沈阳兴齐眼药有限公司，霍乱毒素B 亚基（CTB）购置美国Invitrogen 公司。实验动物与分组：选取72 只健康SD大鼠，6～8 周龄，重量180～210 g，随机分为3 组：TON+BMSCs 注射组（BMSCs 组）、TON+磷酸盐缓冲溶液（PBS）注射组（PBS 组）和假手术组（Sham组），每组各24 只。BMSCs 组、PBS 组大鼠行眶内段视神经钳夹伤造模，Sham 组只暴露视神经。各组分别于造模后第3、7、14、28 天处死6 只大鼠。第25天在各组剩余的6 只大鼠玻璃体腔内注射CTB。

1.2 方法

1.2.1 TON 模型建立 先将大鼠放入含3%异氟烷的氧气、空气（1∶1）混合气体诱导箱内诱导麻醉5 min，大鼠翻身反射消失后，继续予含1.5%异氟烷的氧气、空气（1∶1）混合气体经面罩维持麻醉。……