一种脊髓型颈椎病慢性压迫性动物模型的建立及评价
2021-12-28李成立曲军杰陈松张为
李成立,曲军杰,陈松,张为*
(1.滨州医学院烟台附属医院骨科,山东 烟台 264100;2.河北医科大学第三医院脊柱外科,河北 石家庄 050000)
脊髓型颈椎病(cervical spondylotic myelopathy,CSM)是一种以运动感觉障碍为主的常见颈椎病,病变机理为颈椎退变、韧带异常增生钙化等,导致椎管容积减少,从而继发脊髓的慢性压迫[1]。脊髓受到慢性机械压迫后可继发神经元细胞损伤、局部微循环障碍、炎症反应,从而造成脊髓的损伤性病变,出现功能障碍[2]。本研究从构建SD大鼠脊髓型颈椎病模型基础实验出发,采用聚乙烯醇-聚丙烯酰胺互穿网络水凝胶植入大鼠C5~7椎板下,建立脊髓型颈椎病慢性压迫性大鼠模型,研究脊髓不同压迫程度、不同时间点的病理学形态变化及相应节段椎间盘中相关炎症因子的表达情况,并研究炎症因子表达程度与颈椎退行性病变程度的相关性。
1 资料与方法
1.1 主要实验试剂 HE 染色试剂盒(北京索来宝科技);脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal dexynucleotidyl transferase dutp nick end labeling,TUNEL)细胞凋亡检测试剂盒(美国,Promega Corporation);Western blot抗体(上海恒斐生物科技有限公司)。
1.2 试验方法
1.2.1 实验动物与模型建立
1.2.1.1 实验动物 购入70只3个月龄健康雄性SD大鼠,从1~70编号,随机分为三组,对照组(n=10)、轻度压迫模型组(n=30)、重度压迫模型组(n=30)。SD大鼠来自河北医科大学实验动物中心。
1.2.1.2 水凝胶材料的制作 配制10%聚乙烯醇水溶液,然后用液氮进行3次冷冻-解冻,使之成凝胶态。将上述制得凝胶置于3.0 mol/L丙烯酰胺溶液中,溶胀充分后置于60Coγ射线下进行处理形成聚乙烯醇-聚丙烯酰胺互穿网络水凝胶,再将其放入10%戊二醛水溶液中浸泡30 s,重复10次浸泡烘干操作,最后将制得的水凝胶用环氧乙烷消毒后备用。……
