孝梦甦，朱庆莉，赵辰阳，李建初，吕 珂，冯海凉，刘玉琴，牛梓涵，罗焱文，姜玉新*

(1.中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院超声医学科 协和转化医学中心，北京 100730；2.中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院细胞资源中心，北京 100005)

乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤之一。三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer， TNBC)指雌激素受体(estrogen receptor， ER)、孕激素受体和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2， HER2)均为阴性的乳腺癌，在乳腺癌中占比约为20%～30%。不同于其他亚型乳腺癌，TNBC侵袭力强、恶性度高、预后差、复发及转移率高[1]，肺、脑及骨转移率高，死亡率高，对传统化学治疗相对较不敏感[2]。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor， EGFR)在TNBC中的表达程度明显高于其他亚型乳腺癌；约80% TNBC高表达EGFR[3]，而其他亚型中仅10%表达EGFR[4]，使得EGFR成为近年诊断及治疗TNBC的重要靶点之一[5-6]。本研究采用超声造影(contrast enhanced ultrasound， CEUS)动态观察小鼠TNBC模型不同阶段TNBC病灶及新生血管发展情况，评价EGFR通路靶向药物治疗TNBC的效果。

1 资料与方法

1.1 实验动物及主要材料 35只雌性非肥胖糖尿病及严重联合免疫缺陷(nonobese diabetic/severe combined immunodeficiency， NOD-SCID)小鼠，4～5周龄，体质量16～18 g，购自华阜康生物科技股份有限公司。EGFR通路抑制剂为司美替尼(Selleck公司)，磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase， PI3K)选择性抑制剂为GDC-0941(Selleck公司)，人乳腺癌细胞MDA-MB-231、RPMI1640培养基及胎牛血清由国家实验细胞资源共享平台中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心提供。

1.2 构建模型 于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中复苏MDA-MB-231细胞，置于37℃、5% CO2培养箱内，每4～6天进行传代；待70%～80% MDA-MB-231细胞汇合度状态良好时收集细胞并计数，以1×107个细胞/只接种于5只小鼠右侧腋窝皮下。……