张镜兰，陈 冉

（大理白族自治州疾病预防控制中心检验中心，云南大理 671000）

据报道， 利福平在多重耐药（multidrug resistant，MDR）菌株中非常常见，其发生频率超过95%，因此，利福平耐药性可以用来作为耐多药结核病（multidrug resistant tuberculosis，MDR－TB）的一个非常重要的指征，而耐药肺结核病已经逐渐成为肺结核病有效防治和控制的障碍〔1〕。目前，传统结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）药敏试验方法是我国基层实验室中常用的一种确认耐药肺结核的方法，也是判定耐药肺结核病因的一个金标准，但其具有耗时长等特点，易延误疾病的诊断和治疗。Xpert MTB/RIF 作为一种基于实时聚合酶链反应（Real－time PCR）技术，是可同时实现MTB和利福平耐药性指标检测的试剂盒平台〔2-3〕。近年来，该技术已成为世界卫生组织推荐使用的分子生物学诊断技术〔4〕。本研究运用该技术对MTB 和利福平耐药的抗菌敏感性和特异性分别进行了检测验证，并与传统方法进行比较，验证其检测的可行性与准确性，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 收集2019年1月至12月大理白族自治州12 县（市）定点医院肺结核患者和疑似患者痰培养阳性菌株，共546 株。

1.2 试验方法

1.2.1 培养基 采用中国珠海贝索分枝杆菌药敏罗氏培养基，4 ℃保存，均在有效期内使用。

1.2.2 菌型联合鉴定 操作方法严格参照《肺结核病实验室检验规程》，进行对硝基苯甲酸（pnitrobenzoic acid medium，PNB） 培养基和噻吩－2－羧酸酰肼（thiophene 2 －carboxylic acid hydrazine medium，TCH） 培养基两种不同鉴定菌型培养基的联合生长活性试验，初步确定MTB 和非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacteria，ntm），进一步对MTB 实施比例法药敏试验〔5〕。

1.2.3 比例法药敏试验 对利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇、氧氟沙星和卡那霉素6 种抗结核药物分别进行药敏浓度试验，接种后培养基置于37 ℃培养4 周后报告结果。……