蒲卢兰，谢少利，李金穗，苏小涵，谭巧，高砚春，邓世山，侯令密，3

[1.川北医学院附属医院甲状腺乳腺外科、乳腺癌生物靶向研究室、院士（专家）工作站，四川南充637000；2.川北医学院解剖学教研室，四川南充637000；3.四川大学华西医院营山医院甲状腺乳腺外科，四川南充637000]

三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）是一种雌孕激素受体及HER-2 表达均呈阴性且恶性程度极高的乳腺肿瘤，因为缺乏特异性的治疗靶标，临床预后极差，寻找TNBC 早期诊断和治疗的靶点尤其重要[1-2]。课题组前期研究发现脂肪非典型钙黏蛋白4（FAT4）在TNBC 组织中呈低表达，FAT4 的低表达与TNBC 患者的恶性生物学特征（淋巴结转移、组织学分级等）及不良预后密切相关[3-4]。但是FAT4 影响TNBC 的具体机制尚不明确。相关研究表明FAT4 作为Hippo 信号通路的上游因子，能够诱导该通路的磷酸化影响肿瘤细胞的功能表型[5-8]。为进一步研究FAT4 对TNBC恶性生物学行为的影响，探讨FAT4 在TNBC 中的作用机制。本研究通过细胞学模型检测降低FAT4表达水平后TNBC 细胞系生物学行为（增殖与凋亡、迁徙与侵袭）的改变，并检测细胞EMT 表型及通路下游蛋白YAP 的表达及磷酸化改变，初步探讨其相关性与机理，旨在为FAT4 调节TNBC 增殖与凋亡、侵袭与转移的机制提供进一步的理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A 及TNBC 细胞系BT-549、MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-436 均购于中国科学院细胞总库；川北医学院分子免疫研究所提供转染所需大肠杆菌DH5α 菌；慢病毒载体介导的FAT4 沉默体系及对照，由上海吉凯基因化学技术有限公司负责构建及包装。……