冉思邈，谭爱华，石和元，王 平

（湖北中医药大学老年医学研究所，湖北武汉 430065）

斑马鱼容易大规模饲养，3 个月可性成熟，雌鱼每周可产卵1 次，每次产卵约为200～300枚，受精在体外完成，透明可见，便于观察。由于斑马鱼与人类基因同源性高，可作为多种实验动物模型的斑马鱼备受科研工作者的青睐。目前斑马鱼睡眠剥夺的方式主要有光照、咖啡因、持续流动水流、感官刺激、电刺激、物理摇晃等方式［1-4］。其中持续流动水流、感官刺激和电刺激需要专用的仪器与设备，而作为诱导睡眠剥夺方便快捷方式的光照与咖啡因对实验室要求较低，运用较多。但使用光照与咖啡因进行睡眠剥夺后，两者对斑马鱼行为学影响有何差异未见报道，本研究对两种方式诱导斑马鱼睡眠剥夺模型后表型和行为学改变进行了比较。

1 材料与方法

1.1 实验动物

实验动物采用野生型AB 系斑马鱼，购自中国科学院水生生物研究所国家斑马鱼资源中心，饲养于湖北中医药大学老年医学研究所斑马鱼实验室。斑马鱼胚胎的繁殖以自然成对交配的方式进行，斑马鱼幼鱼生长到5 dpf 时神经系统与器官已基本发育成熟，故本次实验采用5 dpf 的幼鱼进行。饲养条件如下：鱼房温度为（28.5±1）℃，光暗条件为14∶10 h 循环交替，养鱼水pH 值为7.0～8.0，在此期间斑马鱼可从自身卵黄囊中获取营养，无需喂食。

1.2 主要试剂及仪器

咖啡因（CAS. NO. 58-08-2），体视显微镜（PXS-1020，上海蔡康光学仪器有限公司），斑马鱼行为分析系统（Videotrack Track 3.5，法国View Point Life Sciences），96 孔板（Nest Biotech，批号：701001）。

1.3 方法

1.3.1 药 物 制 备 配 置 浓 度 为200 μ mol/L［5］的咖啡因养鱼水溶液，现配现用。……