徐修鹏 季 晶 刘 宁 李海林 路 华

胶质瘤是成人中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，具有多种恶性生物学表型，如恶性增殖能力强、易向周边脑组织侵袭和放化疗抵抗等[1]。近年来，尽管胶质瘤的综合治疗取得了一定程度的进展，但病人中位生存期却未明显延长，部分归因于胶质瘤的恶性增殖能力[2]。因此，探索胶质瘤恶性增殖能力的分子调控机制，有助于开发更有效的治疗措施。

同源框基因家族在进化上高度保守，参与调控胚胎发育和细胞分化[3]。同源异型盒基因A5（homeobox gene A5，HOXA5）是同源框基因家族中的一员，既往研究显示HOXA5在多种恶性肿瘤中异常表达，与肿瘤的多种恶性生物学表型密切相关[4]。本文探讨HOXA5 在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖能力和细胞周期的影响。

1 材料与方法

1.1 生信分析 计算机检索中国胶质瘤基因组图谱（Chinese Glioma Genome Atlas，CGGA；http://www.cgga.org.cn）。从mRNAseq-693 和mRNAseq-325 芯片中获取HOXA5 mRNA 在低级别胶质瘤（WHO 分级Ⅱ级）和高级别胶质瘤（WHO 分级Ⅲ、Ⅳ级）中的表达及相应的病人生存信息。在高级别胶质瘤中，以HOXA5表达水平的平均值为界限，分为低表达组和高表达组，Kaplan-Meier 法分析HOXA5 表达水平与高级别胶质瘤病人预后的关系。

1.2 胶质瘤U87、U251细胞培养、转染及分组U87和U251 细胞（中国科学院细胞库）置于含10%胎牛血清DMEM中培养并传代。取对数生长期胶质瘤细胞种植于6孔板中，待细胞汇合度达到75%左右时，参考Lipofectamine2000（美国Invitrogen公司）说明书转染siRNAs。细胞分组两组：阴性对照组（转染siRNA-ctrl）和敲低组（转染siRNA-HOXA5）。36 h后收集细胞，提取总蛋白，验证干扰效率，并用于后续的生物学实验。……