曾娇娇，余世琴，周景文*

1(江南大学 生物工程学院，工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡，214122) 2(未来食品科学中心(江南大学)，江苏 无锡，214122)

酪醇[2-(4-羟基苯基)乙醇，tyrosol]是一种天然的多酚类物质，广泛存在于红景天、女贞、橄榄等植物中，具有抗氧化、消炎等多种药理活性[1]。目前酪醇的合成主要有植物提取、化学合成及微生物代谢生产3种途径。由于植物提取率低、化学合成反应复杂等问题的存在，微生物细胞工厂的优势逐渐凸显。在微生物代谢中，酪醇是酪氨酸代谢途径的下游产物，是橄榄苦苷、羟基酪醇、红景天苷等重要天然产物的关键前体。微生物中酪醇的合成途径主要有3种：(1) SATOH等[2]在大肠杆菌中表达植物罂粟(Papaversomniferum)来源的酪氨酸脱羧酶(tyrosine decarboxylase，TDC)和藤黄微球菌(Micrococcusluteus)来源的酪胺氧化酶(tyramine oxidase，TYO)，并结合大肠杆菌内源的乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase，ADH)，实现了酪醇的从头合成，产量达到69 mg/L；(2) YANG等[3]在大肠杆菌中过量表达来源于酿酒酵母的苯丙酮酸脱羧酶(phenylpyruvate decarboxylase，ARO10)，得到了800.40 mg/L 酪醇；(3) CHUNG等[4]对拟南芥(Arabidopsisthaliana)、矮牵牛(Petuniahybrid)和荷兰芹(Petroselinumcrispum)3种来源的芳香醛合成酶(aromatic aldehyde synthase，AAS)进行了检测，发现表达PcAAS菌株的产量最高，达12.9 mg/L。在这3条途径中，仅AAS可以将酪氨酸一步转化为生产酪醇所需的直接前体物质。因此，本研究将从此途径入手开展酪醇的生物合成研究。

ZHOU等[5-6]在大肠杆菌基因组中挖掘得到一系列梯度强度的组成型启动子，并用于强化己二酸的生产。为了提升酪醇的产量，本研究以E.coliBL21 (DE3)为出发菌株，使用组成型启动子PcspA[5]取代PT7启动子，并运用该质粒过量表达PcAAS来构建酪醇合成的生物途径。……