欧洋华，江咏梅

(四川大学华西第二医院检验科 出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室，成都 610041)

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)于1882年由Robert Koch首次提出并认定为结核病的病因[1]。结核病是21世纪最重要的公共卫生问题之一，居全球感染性疾病病死率之首[2]。世界卫生组织报告显示，2019年全球新发结核病1 000万例，新增患者中约50万例对利福平(rifampin，RIF)耐药，其中78%为耐多药结核病[3]。早诊断、早隔离、早治疗是减少肺结核发病和死亡的关键。然而，儿童结核病由于临床表现不典型，标本获取困难，60%～70%的患儿无法通过传统实验室检查得到病原学确诊[4]。此外，潜伏期结核、亚临床结核、肺外结核、获得性免疫缺陷综合征并发结核也是临床诊断的重点和难点。值得警惕的是，诊断滞后可能导致个体化治疗的延误、MTB的传播和耐药菌株的产生。因此，寻找快速、高效、准确的诊断方法对结核病尤其是耐药结核病的早期发现至关重要。目前，结核病的病原学诊断金标准为痰涂片抗酸染色、MTB培养和药敏试验，但因MTB生长缓慢，以上检查存在镜检阳性率低、操作繁琐、培养周期长、特异度差等缺点。近年来，分子生物学诊断技术的快速发展有望解决这一难题，包括实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)、环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)、线性探针(line probe assay，LPA)和全基因组测序(whole-genome sequencing，WGS)等，其优势在于检测周期更短、特异度和生物安全性更高[5]。目前，正在进行临床前研发的诊断结核分子的新技术已超过50种[6]。现就MTB分子诊断方法研究进展予以综述。

1 实时荧……

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