邢倩倩，刘振民，游春苹

（乳业生物技术国家重点实验室，上海乳业生物工程技术研究中心，光明乳业股份有限公司乳业研究院，上海 200436）

亲水色谱是一种类似于正相色谱保留模式的分离手段，主要以水（2%～40%）和乙腈（大于60%）作为流动相在极性固定相表面完成目标物质分离。亲水色谱固定相主要以硅胶或有机聚合物等为载体，通过衍生化上氨基、氰基、二醇基、酰胺基、聚(琥珀酰亚胺)基、糖基及两性离子基团构成[1]。乙腈是亲水色谱模式下最常用的有机流动相，甲醇和其他低质子数的醇可作为有机流动相与亲水性能较好的固定相结合使用[1]。亲水色谱流动相中常用的缓冲盐为甲酸铵、乙酸铵等挥发性盐，该类缓冲盐与质谱、蒸发光散射检测器和电喷雾检测器具有较好的适应性。

亲水色谱主要通过极性化合物在高比例有机溶剂的流动相和极性固定相表面的富水层之间的分配作用来实现分析物的保留。亲水色谱保留作用机理不仅仅是液液分配，还包括离子作用、氢键作用和偶极-偶极作用表现出来的吸附作用[2]。固定相、流动相、分析物以及它们的共同作用（例如固定相-流动相、固定相-分析物、流动相-分析物和固定相-流动相-分析物）等次级作用也会影响亲水色谱保留机理[3]。通常判断一个化合物是否适合亲水色谱分离的经验法则就是这个物质是否在反相色谱没有保留，同时这个化合物是否为极性亲水物质（比如logKow 和logD 为负值）。

本文围绕亲水色谱在食品内源组分（核苷碱基、核苷、核苷酸，氨基酸、多肽和蛋白质，磷脂酰胆碱类化合物，碳水化合物，维生素）分离分析方面的应用展开讨论，以期为食品中未知成分的分离分析提供参考。……