徐凤敏 陈昱伶 任 玲 蒙春梅 李倩倩 胡为民 （川北医学院微生物学与免疫学教研室，南充637100）

食管癌是世界上常见的癌症之一，主要包括食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）和食管腺癌，鳞癌是我国食管癌最主要的病理类型。我国是食管癌发病率和死亡率最高的国家，并且发病率有明显的地区分布特点，其中，川北地区的盐亭、南部、阆中等是高发地区之一［1-2］。食管癌因为发现晚、进展快，导致预后较差［3］。本课题组的前期研究发现食管鳞癌的发生发展与1-磷酸鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate，S1P）/1 型 1-磷酸鞘氨醇受体（sphingosine 1-phosphate receptor 1，S1PR1）通路密切相关：胞浆S1PR1 蛋白在食管鳞癌细胞中表达明显高于癌旁正常上皮细胞，在低分化的ESCC 组织中比在高分化的组织中表达更高；胞浆S1PR1 促进细胞周期G1/S 期过渡，增强Eca109细胞的迁移能力［4］。课题组也采用有参转录组高通量测序技术，发现在食管鳞癌Eca109细胞中过表达S1PR1 导致补体 B 因子（complement factor B，CFB）表达增加。本研究将进一步探究S1P/S1PR1 通路对CFB 的调节，以及CFB 对ESCC 细胞增殖和迁移的影响，为食管鳞癌的发病机制、诊断、治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株 人食管鳞癌Eca109 细胞、TE-1 细胞、KYSE150 细胞购自中国典型培养物保藏中心，并由本实验室传代培养。

1.1.2 主要试剂 包含人S1PR1 全长与EGFP 融合表达的载体S1PR1-EGFP 及其对照载体Control-EGFP由美国麻省总医院Dr.Wu MX教授惠赠。RPMI1640 培养基、胰酶购自Gibco 公司。胎牛血清购自浙江天杭生物科技股份有限公司。无脂肪酸牛血清白蛋白（fatty acid-free bovine serum albumin，FAF-BSA）购自Sigma 公司。CCK8 试剂购自上海碧云天生物技术有限公司。LipofectamineTM2000 购自Invitrogen 公司。总RNA 提取试剂盒SV Total RNA Isolation System 购自Promega 公司。……