王兆建 （青海大学附属医院儿科，西宁810001）

小儿肺炎是一种下呼吸道病原体感染的炎症性疾病，可累及心脏、肝脏、神经系统、消化系统，是我国小儿住院死亡率最高的疾病。因此，探究小儿肺炎的发病机制已成为目前研究的热点和难点。MicroRNA（miRNA）是一类非编码内源性的小RNA，它们通过与靶基因的3'端非编码区结合，下调靶基因的表达水平，对生物体中许多基本生命过程起到重要的调控作用。miR-9-5p 作为一种炎症相关miRNA，通过调控炎症反应在关节炎、多发性硬化等多种疾病的生理和病理过程中发挥着重要的作用［1-2］。但对miR-9-5p 是否参与调控肺炎的炎症反应研究较少。趋化因子配体11（chemokine C-X-C motif ligand 11，CXCL11）是CXC 趋化因子家族中的一员，通过介导炎症细胞浸润到组织损伤部位参与重症肺炎的发病［3］。生物信息学筛查发现，CXCL11可能是 miR-9-5p 的靶基因。miR-9-5p 与 CXCL11 在肺炎发病过程中是否具有调控作用，有待于进一步探究。本研究以脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的幼年小鼠肺炎为模型，初步探讨了miR-9-5p 靶向调控CXCL11 对幼年肺炎模型小鼠的作用及其分子机制。

1 材料与方法

1.1 材料 兔抗小鼠Bax、CXCL11、TLR4、p-p65、p-I-κB 和 GAPDH 单克隆抗体及 HRP 标记山羊抗兔的二抗、IL-1β（ab216165）、TNF-α（ab208348）的ELISA 试剂盒均购自艾博抗（上海）贸易有限公司；Trizol 试剂、一步法反转录荧光定量试剂盒、蛋白双染marker、显影液、脱脂奶粉、LPS、miR-9、CXCL11及内参基因引物均购自上海生工生物科技有限公司；双荧光素酶检测报告系统试剂盒、miR-9-5p agomir 及其对照（agomir-NC）、miR-9-5p mimic 及其对照（mimic-NC）、pcDNA3.1-CXCL11 及其对照（pcDNA3.1）均购自美国Promega 公司；293T 细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 实验分组及LPS 诱导的幼年小鼠肺炎模型的建立 健康雄性C57BL/6J 幼年小鼠由中国医学科学院医学实验动物研究所提供，合格证号：SCXK（京）2019-0011。……