佟 玲，李义慧，李 佳，王建功（.唐山市人民医院药剂科，河北 唐山 06000；.唐山市人民医院肿瘤综合治疗科，河北 唐山06000；.唐山市人民医院放化一科，河北 唐山 06000）

三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）是乳腺癌的一种类型，具有较高的复发性和转移性[1]，而血管生成对肿瘤的发展和转移至关重要，血管生成主要由通过血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）及其受体（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）诱导[2]。阿帕替尼（apatinib，APA）是一种口服的小分子抗血管生成靶向药物，其可以通过与VEGFR-2结合并抑制其功能，在我国阿帕替尼已经被批准用于晚期胃癌的治疗[3]，其在乳腺癌中的应用正在进行临床试验，一项Ⅱ期临床研究结果显示大剂量阿帕替尼对于TNBC具有一定的治疗效果[4]。一项体外研究显示阿帕替尼可以抑制TNBC细胞的增殖和迁移[5]，但是关于阿帕替尼在TNBC中的作用和机制尚不明确。有体内研究显示阿帕替尼可通过抑制ERK/JAK2-STAT3抑制食管癌的进展[6]。本文旨在探讨阿帕替尼通过ERK/JAK2-STAT3途径对TNBC的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料

人TNBC细胞系MDA-MB-468细胞株（中国医学科学院上海细胞库）。BALB/c裸鼠（雌性，4 ～ 5周龄，SPF级，南京金陵医院）。DMEM培养基血清和抗体（美国Invitrogen公司）。阿帕替尼（美国MCE公司）。逆转录cDNA试剂盒和SYBR Green PCR Master Mix qPCR试剂盒（瑞士Roche公司）。anti-VEGFR-2、anti-ERK、anti-p-ERK、anti-JAK2、anti-STAT3、anti-p-STAT3（美国Abcam公司）。PVDF膜（美国Bio-Rad公司）。TUNEL凋亡染色试剂盒。倒置显微镜（日本Olympus IX71）。

1.2 荷瘤裸鼠模型建立、分组及干预方法

将MDA-MB-468细胞在DMEM培养基中培养，然后将处于对数生长期的MDA-MB-468细胞消化、洗涤、重悬细胞（密度为1×107个·mL-1）。将0.2 mL的细胞悬液注射在腋下。每日观察肿瘤生成情况，在建模14 d时经过测量和计算肿瘤体积大于60 mm3提示建模成功。……