张 璞，刘晓蕾，邵 国

(1.内蒙古科技大学包头医学院，内蒙古包头 014040；2.内蒙古自治区低氧转化医学重点实验室；3.首都医科大学宣武医院低氧适应转化医学北京市重点实验室)

脑卒中具有高发病率、高复发率、高致死率和高致残率的特点，严重威胁着人类的健康和生存质量。缺血性脑卒中占脑卒中发病的85 %左右[1]。血管再通和神经保护是治疗缺血性卒中的两组主要策略[2]。吕国蔚教授最早提出低氧预适应(Hypoxic preconditioning，HPC)可以增加神经细胞对低氧缺血耐受。远隔缺血预适应(Remote Ischemic Preconditioning，RIPC)是指通过非侵入方式对非重要器官(如肢体)的反复缺血刺激使重要器官(如脑)产生对缺血/低氧的耐受[3]。RIPC以其安全无创和简单易行的特点成为治疗缺血性卒中的具有良好临床转化前景的方法。课题组前期研究发现RIPC血清外泌体中miR-126增加[4]，而miR-126为内皮细胞特异的microRNA，据此推测RIPC过程中内皮细胞分泌的物质可以对神经细胞产生保护作用。本研究利用体外培养的人微血管内皮细胞(HMEC-1)，对其进行HPC后分离培养基(含内皮细胞的分泌物质)，观察HPC条件下内皮细胞的分泌物质对神经细胞的保护作用，探讨RIPC作用的可能细胞机制。

1 对象与方法

1.1实验细胞 人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)购于中国科学院上海生科院细胞资源中心，人微血管内皮细胞(HMEC-1)购于上海信裕生物科技有限责任公司。SH-SY5Y细胞培养于含有10 % FBS和0.6 %青链霉素的1640完全培养基中，HMEC-1细胞培养于HMEC-1完全培养基(购于上海信裕生物科技有限责任公司)，培养条件为37 ℃、21 % O2+5 % CO2+74 % N2。……