甲型流感H3抗原在毕赤酵母系统中的优化表达与纯化
2021-11-05李安娜汤岩松龙浩雨刘坤山
陈 溥,李安娜,汤岩松,龙浩雨,刘坤山,周 勉
(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237)
流感是世界范围内可以同时感染人和动物的传染性疾病。流感病毒非常活跃,多次在流感季节“袭击”全球,逐渐成为全球疾病防控的重点病毒之一。甲型流感病毒为最常见的流感病毒,并且最容易发生变异。甲型流感病毒的一些亚型如我们熟知的“禽流感”,病毒基因变异后能够感染人类,感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等,多数伴有严重的肺炎。严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡,病死率较高。目前,我国每年仍会季节性地受到甲型流感的肆虐,严重危害畜牧业发展和人类健康。甲型流感对人类致病性高,曾多次引起世界性大流行。甲型流感病毒根据血凝素(hemaglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)抗原性不同,又分为许多亚型,HA可分为17个亚型(H1~H17),NA有10个亚型(N1~N10)。1918年以来,HA的2个亚型(H1和H3)一直在人群中流行,导致高发病率和高死亡率[1-2]。
甲型流感H3N2是导致人类感染死亡的最主要的毒株之一,而目前防治流感最有效而安全的方式为接种疫苗[3]。传统制备流感疫苗的方法是在鸡胚中培养病毒,灭活纯化后即得到经典的流感灭活疫苗,其主要抗原成分为流感病毒HA[4]。然而,该方法生产周期长,需要巨大的工作量,同时难以对抗甲型流感抗原的易突变性。因此,开展新型流感疫苗及其关键技术的研发仍然是流感研究的热点。流感病毒基因工程疫苗是近年兴起的一门新技术,是将流感病毒基因片段克隆入合适的表达载体,在体外表达病毒抗原后经纯化制备而成的疫苗,常用的表达系统有大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞或杆状病毒等。……
