三重real-time PCR同步检测黄牛、 水牛和牦牛成分
2021-11-05张明哲沈旭芳虞惠贞尹文秀张晓峰
吴 姗,张明哲,方 云,陈 哲,张 荃,孙 超,沈旭芳,虞惠贞,尹文秀,张晓峰
(浙江省检验检疫科学技术研究院,浙江 杭州 310016)
在经济利益驱动下的肉制品制假贩假事件屡禁不绝,已成为中国食品质量控制面临的重要挑战之一。牛肉一直是制假掺假的重灾区,除了用价格相对低廉的猪肉、鸡肉、鸭肉冒充牛肉外,更有甚者将狐狸、水貂等肉掺入牛肉中进行销售。此外,由于牛肉本身可分为黄牛肉、水牛肉和牦牛肉,且这3 类肉之间也存在较大的价格差异,一般来说牦牛肉价格高于黄牛肉,黄牛肉又高于水牛肉,因此往往会出现水牛肉、黄牛肉被用来冒充牦牛肉,而水牛肉还被用来冒充黄牛肉。
近年来,国家针对肉制品掺假问题加强检测监管力度,大力支持肉品检测方法的研究。目前对肉类真伪鉴别的检测技术主要包括基于蛋白的免疫技术[1-2],基于代谢物质的光谱技术[3-4]、电子鼻[5-6]、电子舌[7]技术,以及基于核酸的分子生物学技术等。由于DNA的生物学稳定性,不论是在生肉或是熟肉,或是在成分多样复杂的复合食品中,即便是在腐败变质的肉制品中,其物种特异性的DNA都能稳定存在,因此分子生物学的鉴定方法,仍是目前比较常用和可靠的鉴定方法。
早在1998年,为了防止疯牛病通过饲料传播,Tartaglia等[8]利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)在饲料中进行牛源性成分的检测。此后,在PCR基础上又衍生了PCR-限制性片段长度多 态性[9-10]和PCR-单链构象多态性分析[11]等技术。实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)的产生,免去了PCR技术后续凝胶电泳的步骤,同时能对整个PCR过程进行实时监测,因此该方法目前已成为一种较普及的用于肉制品真伪鉴别的方法[12-16]。……
