李索妮 李丽娜 马婕群 郑 琪 张彦兵 翟 阳 周 菁

结直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，也是全球肿瘤相关死亡的主要原因之一[1]。在西方发达国家中，结直肠癌是发病率仅次于肺癌的第2位恶性肿瘤，近年来中国结直肠癌的发病率迅速升高[2]。目前临床上虽已对结直肠癌的常规治疗方法(包括外科手术)进行了改进，但仍有超过三分之一的患者发生了转移[3]。研究表明结直肠癌形成过程与促癌基因的激活及抑癌基因的失活密切相关[4]。因此，探寻更多新的生物标志物有助于开发预防和治疗结直肠癌的新方法。上皮细胞转化序列2(ECT2)基因在进化上高度保守，研究表明ECT2在多种恶性肿瘤(包括非小细胞肺癌和乳腺癌等)中表达上调[5-6]。近年来研究显示，ECT2的异常表达与肿瘤患者的总生存期及预后等密切相关[7]。有研究报道ECT2在结直肠癌组织中呈高表达，且与肿瘤的大小及TNM分期有关[8]。然而，ECT2在结直肠癌发生和发展中的作用及机制方面鲜见报道。本实验探究了ECT2基因对人结直肠癌SW620细胞侵袭和迁移的影响，以期为ECT2基因作为结直肠癌治疗的新靶点提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

人结直肠癌细胞株SW620(中国科学院上海细胞库)；胎牛血清、RPMI-1640培养基、Matrigel基质胶(美国Gibco公司)；胰蛋白酶(美国Sigma公司)；ECT2特异性siRNA及非特异性siRNA(上海吉玛生物有限公司)；脂质体Lipofectamine 2000转染试剂、TRIzol试剂(美国Invitrogen公司)；8 μm孔径的Transwell小室(美国Millipore公司)；鼠抗人ECT2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9抗体及辣根过氧化物酶标记的山羊抗鼠二抗(美国CST公司)；……