高海兵，牛彩红，赵志宏，霍小琴，毕宇

（山西省阳泉市第一人民医院，山西 阳泉 045000）

0 引言

支气管肺炎是累及支气管壁和肺泡的炎症，为儿童时期最常见的肺炎，2岁以内儿童多发。一年四季均可发病，北方多发生于冬春寒冷季节及气候骤变时。儿童因年龄因素造成沟通困难，加之病情变化速度快，而且由于儿童自身免疫系统的不完善及婴幼儿的早期免疫特点，过早过度使用抗生素会对儿童免疫系统造成不必要的损伤，所以快速、准确判断感染类型应对儿科上呼吸道感染性尤其重要。随着医疗水平的发展与提升，呼吸道病原体九联检、细胞因子测定逐渐应用于该病症的检测中，本文对我院儿科85例支气管肺炎病例的呼吸九联检和细胞因子检测进行回顾性分析，以期得到对感染的早期鉴别。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取2019年10月至2020年12月在我院儿科收治的诊断为支气管肺炎患儿85例作为观察组，男46例，女39例，年龄0.5-10岁，平均（6.42±1.94）岁。诊断标准以临床有发热、咳嗽、呼吸急促的症状。肺部听诊闻及中、细湿啰音和（或）胸部影像学有肺炎的改变可诊断为支气管肺炎。对照组为同期健康体检儿童30例，男15例，女15例，年龄1-10岁，平均年龄（6.35±2.02）岁，近期无感染病史、无过敏及免疫相关疾病，两组年龄的差异无统计学意义。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂

呼吸九联检采用间接免疫荧光法，西班牙VIRCELL.S.L.公司九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒，OLYMPUS-BX41型荧光显微镜；细胞因子检测采用美国贝克曼公司FC-500流式细胞分析仪，运用流式荧光法，使用江西赛基生物技术有限公司TH1/TH2/TH17亚群检测配套试剂。

1.2.2 分析方法

早晨空腹静脉采集血液6mL，分别加入2支分离胶试管中，静置20 min，1620g离心15min，取血清检测，如不能立即检测，保存于-20℃冰箱中，检测前解冻（不可反复冻融）。将血清按说明书稀释后加入荧光片中，孵育，洗涤，加荧光二抗，封片，在荧光显微镜下观察，绿色荧光细胞为阳性细胞，200倍下每个视野＞5个阳性细胞为标本阳性，以此判断肺炎衣原体（CP）IgM抗体、肺炎支原体（MP）IgM抗体、嗜肺军团菌（LP）IgM抗体、腺病毒（ADV）IgM抗体、Q热立克次体（COX）IgM抗体、人呼吸道合胞病毒（HRSV）IgM抗体、A型流感病毒（AIV）IgM抗体、B型流感病毒（BIV）IgM抗体、人副流感病毒（HPIV）IgM抗体是否阳性。吸取血清25ul加入试管中，加入离心后配制的捕获微球25ul、荧光抗体25ul混匀，避光孵育2.5h后，加入1mL生理盐水，200g5分钟离心，弃去上清液，加入3mL生理盐水，上机检测细胞因子，在流式细胞仪测定出荧光强度，利用美国BD公司FCAP Array分析软件中得出细胞因子白介素6（IL-6）、干扰素γ（IFN -γ）含量。

1.3 观察指标

呼吸道九种病原体抗体至少有一种阳性表达即为阳性。IL-6按试剂盒说明推荐阳性临检值为20pg/mL,所以设＞20pg/mL为阳性；IFN -γ按试剂盒说明推荐阳性临检值为17.3pg/mL,所 以 设＞17.3pg/mL为 阳 性，IL-6和/或IFN -γ有一种阳性表达即为阳性。

1.4 统计学方法

计数资料采用以例数百分比(%)表示，组间比较用c2和Fisher精确概率法分析，P＜0.05差异有统计学意义，P＜0.01差异有显著统计学意义。

2 结果

观察组85例（由于存在双重或多重混合感染，表中例数和占比存在重复计数）患儿中，7例呼吸九联检阴性，占8.2%；阳性结果中占比最高为肺炎支原体抗体，占44.7%，其次为B型流感病毒抗体，占42.4%，最少为嗜肺军团菌抗体，未测出。见表1。

表1 85例支气管炎呼吸九联检占比

单纯检测呼吸九联检敏感度为91.76%，特异度为76.67，正确率为87.83%；单纯检测IL-6+IFN-γ敏感度为83.53%，特异度为96.67，正确率为86.96% ；联合检测敏感度97.65%、特异度76.67%、正确率92.17%。见表2、表3。

在85例支气管肺炎患儿中，有34例进行了≥3次IL-6+IFN-γ检测,将其分为重症组（11例）和普通组（23例），标准参照支气管肺炎诊疗规范，重症组为支气管肺炎患者病情危重，表现为除呼吸系统改变外，还包括循环、神经、消化等系统功能障碍；普通组为支气管肺炎主要症状患者。按其中一项或两项检测连续升高即为上升趋势，连续下降即为下降趋势。重症组11例中9例呈上升趋势，2例无规律，无下降趋势；普通组中17例呈下降趋势，1例呈升高趋势，5例无规律，两组比较P＜0.01,差异有显著统计学意义。见表4。

表2 呼吸道九联检、IL-6+IFN-γ与临床诊断比较（例）

表3 呼吸道九联检、IL-6+IFN-γ、联合检测指标比较

表4 34例支气管肺炎 IL6 + IFN-γ检测结果

3 讨论

小儿支气管肺炎是累及支气管壁和肺泡的炎症，为儿童时期最常见的肺炎，2岁以内儿童多发，一年四季均可发病，主要由各种病原体引起，常见为支原体、病毒、细菌、衣原体等感染，发病后会引发机体内多种细胞因子升高，而导致免疫功能下降，不利于患儿的健康成长[1]。另外由于小儿支气管管腔狭窄，肺弹力组织发育差，发病后分泌物会增多，阻塞肺部，导致通气功能受限，引起呼吸困难、气促等症状[2-3]，易造成肺功能障碍。支气管肺炎感染诊断的金标准为病原体培养，但由于儿童取样困难，易感菌较多、培养阳性率低、时间长、特殊病原体普通医院不易开展，具有一定的漏诊、误诊率[4-5]等因素，严重制约该疾病的早期诊断与治疗。呼吸九联检为测定血清中病原体IgM抗体，通常在感染后1～2周出现，2～4周达高峰，是急性感染早期敏感的生物学指标。IL-6、IFN-γ是TH1/TH2细胞分泌介导细胞免疫和体液免疫应答效应的促炎因子，IL-6可促进T、B淋巴细胞的增殖分化，是辅助诊断细菌感染的有效指标；IFN-γ可激活巨噬细胞，具有抗病毒及促进主要组织相容复合体分子表达和抗原提呈作用，是病毒感染的辅助诊断指标。IL-6和/或IFN-γ升高提示机体存在炎症反应。

本研究发现观察组85例支气管肺炎患儿呼吸九联检肺炎支原体感染占比最高，达44.7%，依次为B型流感病毒、人副流感病毒、A型流感病毒、腺病毒、人呼吸道合胞病毒、肺炎衣原体、Q热立克次体、嗜肺军团菌，与贾红丽、王凤美[6-7]研究相一致，说明支气管肺炎患儿肺炎支原体感染最高，其次为B型流感病毒。观察组中有7例呈阴性，占8.2%，分析原因为呼吸道九联检均检测病原体IgM抗体，其在感染2～4周内达到峰值，当在峰值前或峰值后检测时，由于抗体浓度较低或者检测试剂灵敏度低、检测下限较高等所致。所以这与患儿感染后出现IgM的时间段和采血时间节点、试剂等相关，提示检测时，应在发病后2～4周内采血分析，并注意试剂质量，避免出现假阴性现象。

对支气管肺炎患儿单纯使用呼吸九联检检测,其敏感度为91.76%，特异度为76.67%,正确率为87.83%。IL-6+IFN-γ检测敏感度为83.53%，特异度为96.67，正确率为86.96%。两者相比呼吸九联检敏感度大于IL-6+IFN-γ检测，这是由于IL-6主要对细菌感染敏感，而IFN-γ对病毒感染敏感，对支原体、衣原体等病原菌敏感性较差原因。但特异度呼吸九联检远低于IL-6+IFN-γ检测。提示临床在支气管肺炎辅助诊断时，呼吸九联检优于IL-6 + IFN-γ检测，但误诊率高于IL-6 + IFN-γ检测。筛查时IL-6 + IFN-γ检测优于呼吸九联检。两者联合检测其敏感度和正确率分别达97.65%、92.17%，高于周燕等[8]研究的呼吸九联检与痰培养联合检测。三种检测方法比较敏感度P＜0.01,特异度P＜0.05,差异有统计学意义,但正确度差异无统计学意义。提示呼吸九联检、IL-6+IFN-γ联合检测可有效提高支气管肺炎患儿病原菌感染类型的准确度，对疾病诊断具有良好的指导意义，但特异度欠佳，三种方法比较，正确度无差异。

研究结果显示，支气管肺炎重症组有9例IL-6+IFN-γ检测呈上升趋势，占重症组81.8%,普通组有17例呈下降趋势，占73.9%。经统计学分析IL6+IFN-γ检测呈上升趋势变化者重症率明显高于下降趋势者。提示支气管肺炎时，IL-6或/和IFN-γ升高，病情有加重倾向，而IL-6或/和IFN-γ下降时，病情减轻或转归。

综上所述，呼吸道九联检联合IL-6、IFN -γ测定在支气管肺炎鉴别诊断中有重要意义，有助于临床医生全面分析病原菌类型，判断疾病严重程度，指导医生及早干预，为临床对该病的研究、治疗、预后提供客观的参考依据。