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可视化单引物等温扩增技术检测发酵乳制品中沙门氏菌的研究

2021-10-27王妙姝范春刚郑玮丽马晓燕

农产品加工 2021年17期
关键词:乳制品可视化产品

王妙姝,范春刚,3,郑玮丽,3,王 震,马晓燕

(1. 河北新希望天香乳业有限公司,河北保定 072159;2. 河北农业大学食品科技学院,河北保定 071001;3. 河北省益生功能性乳制品技术创新中心,河北保定 072159)

沙门氏菌是世界上最常见的引发食源性疾病爆发的病原菌[1]。沙门氏菌引起的食物中毒事件位列榜首,具有高检出率、高发病率和高死亡率的特点[2]。2019 年,欧盟发布的食品安全事件统计数据显示,由沙门氏菌污染造成的食物中毒事件占50%以上[3]。营养丰富的发酵乳制品日益受到消费者的青睐,其食用安全性受到人们的高度重视。在乳制品的生产和加工环节中,原料乳极易被沙门氏菌等多种致病菌污染[4-5]。

目前,检测沙门氏菌传统的微生物培养方法存在着耗时长、步骤繁琐等问题[6]。因此,建立一种快速、可靠的检测方法显得尤为迫切和必要。随着分子生物学技术的发展和应用,聚合酶链式反应(PCR) 和环介导等温扩增(LAMP) 等核酸扩增技术以其快速灵敏和特异的优势,逐渐取代传统检测方法,但PCR 技术始终无法摆脱依赖昂贵的热循环仪的局限[7]。LAMP 方法需要4 条或6 条引物,容易造成假阳性结果。

单引物等温扩增技术(Single primer isothermal amplification,SPIA) 是近年来发展的一种新型线性核酸等温扩增技术,具有扩增效率高、忠实性强、有效防污染等优点。试验在SPIA 技术的基础上,结合荧光染料(SYBR Green II) 建立可视化SPIA 检测发酵乳制品中沙门氏菌的方法,可应用于沙门氏菌的风险监测和快速筛选检验。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株

试验所用菌株见表1。……

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