陈宴霞，黄曼娜，邱立明，刘曼，蔺庆辉

青岛中科爱博生物科技有限公司，山东青岛266400

β2-微球蛋白（β2-microglobμlin，β2MG）作为肾功能标志物是早期诊断肾病的一项重要生化指标［1-3］，在正常情况下，由于其体积小，通常在肾小球易过滤，并被肾脏的近端肾小管细胞分解代谢［4-5］，若肾功能受损，则血清中β2MG 就会升高。近年来，β2MG又作为多种肿瘤标志物备受众多学者关注，由于恶性肿瘤细胞具有超强合成β2MG 的能力，在临床上如肾癌、肺癌、乳腺癌、消化系统等恶性肿瘤患者血清中β2MG 含量超过正常范围，已作为联合检测指标广泛应用于肿瘤诊断和监测［5-8］。因此，临床关于β2MG 的血清学检测指标对于疾病诊断具有重要意义，值得大力推广应用。

β2MG 为一种低相对分子质量蛋白，是由99 个氨基酸组成的单链多肽，在第25 和80 位半胱氨酸有1 个链内二硫键，相对分子质量大小为11 800，与免疫球蛋白具有序列同源性，特别是与IgG 分子的CH3 结构域具有同源性［9］。鉴于其重要的临床应用价值，本研究旨在通过基因工程技术，利用两种原核表达载体重组表达人β2MG，并分别对获得的融合蛋白进行活性检测，为后续免疫原的筛选及制备相应的单克隆抗体创造条件，并为相关临床诊断试剂盒的研发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 质粒及菌株 原核表达载体pET-28a（+）（5 369 bp，His-tag）和 pET-32a（+）（5 900 bp，Trx-Histags）由马来西亚Novagen 公司提供；E.coliDH5α和E.coliBL21（DE3）感受态细胞购自日本TaKaRa 公司。

1.2 主要试剂及仪器 质粒小量提取试剂盒为德国Qiagen 公司产品；核酸回收试剂盒购自北京百泰克生物技术有限公司；限制性内切酶EcoRⅠ、Hind Ⅲ为宝生物工程（大连）有限公司产品；……