东淑珍，石翊飒，师永倩，金平

兰州大学第二临床医学院，甘肃兰州730000

甘珀酸（carbenoxolone，CBX）是一类非特异性的缝隙连接（gap junction，GJ）阻滞剂，近年研究发现，CBX 对疼痛有明显的缓解作用，其机制可能是通过减少缝隙连接蛋白43（connexins 43，Cx43）的表达及磷酸化发挥镇痛作用［1］，也可能是通过抑制缝隙连接蛋白1（pannexin 1，PX1）的表达，减少星形胶质细胞对ATP 的摄取及细胞内钙离子浓度的变化发挥镇痛作用［2］。

有报道表明，缝隙连接蛋白（connexin，Cx）在慢性疼痛中发挥重要作用，且有可能成为新一代镇痛药物的靶点［3］。不同于 Cx，PX 的细胞外环上有 2 个半胱氨酸残基，而Cx 的细胞外环上有3 个半胱氨酸残基［4-5］。PX1 以一种半通道单体的形式存在，允许ATP、Ca2+等小分子通过，从而参与星形胶质细胞的激活［6-7］。在炎症性和神经性疾病中，星形胶质细胞被激活，表现为星形胶质细胞增殖并增加其活化标志物胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）的表达。CBX 对PX1 的阻断作用是通过与PX1 的六聚体结合并关闭其通道作用，从而阻断钙离子及其他信号分子的内流。PX1 在星形胶质细胞表面高表达，参与星形胶质细胞的激活。本研究通过建立大鼠切口痛模型，探讨CBX 对大鼠切口痛的影响及PX1 在其发生机制中的作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 CBX（A8389）及CBX 抑制剂10 panx（A2700）购自美国 APExBIO 公司；兔抗 GFAP多克隆抗体（Ab-BF0345）购自美国Affinity 公司；鼠抗PX1 单克隆抗体（ab139715）购自美国Abcam 公司；鼠抗GAPDH 单克隆抗体（sc-365062）购自美国Santa Cruz Biotech-nology 公司；FITC 标记的山羊抗鼠IgG（H+L）（S007）、TRITC 标记的山羊抗兔 IgG（H +L）（S0015）及HRP 标记的山羊抗鼠和山羊抗兔IgG（R0020）购自美国 Proteintech 公司；Von Frey 纤维丝购自美国North Coast Medical 公司；Plantar Tes（t37370）购自意大利UGO BASILE 公司。……