张泽，吴欣怡，丁霄，张伟志，何京隆，陈义勇*

常熟理工学院生物与食品工程学院（常熟 215500）

白背毛木耳（Auricularia polytricha）属于真菌门担子菌纲[1]，多糖是白背毛木耳主要成分之一，研究表明白背毛木耳多糖（polysaccharides fromAuricularia polytricha，APP）具有抗肿瘤[2]、抗血栓、抗凝血、降血脂[3]等作用。用适当的手段对多糖进行结构上的化学修饰，对其生物活性有较大的影响[4-5]。对白背毛木耳多糖的研究主要集中在提取与纯化[6-8]、流变特性[9]、羧甲基化修饰[4]等方面，而对白背毛木耳多糖化学结构磷酸化修饰的研究还未见报道。

前期以白背毛木耳为原料，采用热水浸提法提取白背毛木耳多糖APP，通过离子交换柱层析和凝胶柱层析对APP进行纯化，得到1个白背毛木耳多糖单一组分APP3a[4]，因此以APP3a为对象，对APP3a磷酸化修饰工艺进行探讨，并利用响应面法对APP3a磷酸化修饰工艺条件进行优化，同时探讨磷酸化APP3a（phosphorylated APP3a，P-APP3a）的抗氧化活性，旨在为磷酸化白背毛木耳多糖的工业化制备奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料和试剂

白背毛木耳毛多糖APP3a（实验室经过DEAEcellulose离子交换柱、葡聚糖G-200 凝胶柱分离纯化得到）；正丁醇、三氯甲烷、无水乙醇、三偏磷酸钠、三聚磷酸钠、浓硫酸、浓硝酸、盐酸、过氧化氢等（均为分析纯）；透析袋（截留分子量8 000~14 000，北京索莱宝科技有限公司）；1, 1-二苯基-2-苦苯肼/DPPH（上海楷洋生物技术有限公司）。

1.2 仪器和设备

HH-W4外循环四孔水浴锅（上海赫田科学仪器有限公司）；RE-52A型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器有限公司）；立式循环水多用真空泵（巩义市予华仪器有限公司）；ZNCL-BS智能数显磁力搅拌器（上海越众仪器设备有限公司）；……