孙奕凡 臧淑妃* 杨传玉 汪丽红

非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是单纯性脂肪肝（NAFLD）进展为肝硬化的限速步骤［1-2］。基于我国庞大的NAFLD人群和较高的NASH发生率，对NASH患者进行及时有效的干预具有重要意义。胆汁酸（BA）是由肝细胞以胆固醇为原料合成并分泌的具有两性结构的分子［3-4］，胆汁酸代谢异常与NASH的进展关系密切［5］。消胆胺（CHY）作为胆汁酸螯合剂，临床上用于降低胆固醇，基础实验中用于去除实验动物体内的内源性胆汁酸［4，6］，但其对代谢的影响尚不清楚。而法尼醇X受体（FXR）作为胆汁酸代谢关键分子，激活后可改善NASH炎症和纤维化［7］。本研究拟采用课题组前期建立的ApoE-/-小鼠NASH模型予以CHY干预，观察其对FXR的影响以及防治NASH的作用，并探讨其可能机制。

1 材料与方法

1.1 造模及分组 40只SPF级6周龄雄性ApoE-/-小鼠平均分为4组，对照（LFD）组给予低脂饮食（LFD，货号98121701，品牌Research Diet，美国）喂养，NASH模型（HFHC）组给予高脂高胆固醇饮食（HFHC，货号D12079B，品牌Research Diet，美国）喂养，CHY对照（LFD+CHY）组给予低脂饮食+2%CHY（货号C4650，美国Sigma）喂养，CHY干预（HFHC+CHY）组给予高脂高胆固醇饮食+2%CHY喂养，连续喂养12周。

1.2 实验方法 （1）血液学指标检测：小鼠喂养12周后，采用戊巴比妥钠麻醉，心脏取血800～900 μL后，颈椎脱位法处死，立即无菌获取肝脏、肠道，液氮速冻并置于-80 ℃备用。血液置于1.5 mL离心管静置2 h后，以3000 r/min离心15 min，取上清，使用日立7180全自动生化分析仪测定谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）等指标水平。（2）荧光定量RT-PCR：取肠道及肝脏组织约50 mg，采用TRIZOL/氯仿抽提法提取总RNA，抽提的RNA纯度、浓度均到达质控要求（浓度至少200 ng/μL，纯度1.9～2.0）后，使用罗氏逆……