PRKAA2基因在肿瘤细胞与血细胞中表达差异研究
2021-10-11孙春霞陈书坤郑磊
实用医学杂志 2021年18期
关键词:检测
孙春霞 陈书坤 郑磊
南方医科大学南方医院检验科(广州510515)
癌症已经成为全球最严重的致死性疾病之一。据全球癌症统计数据估计,2020年全球癌症发病人数和死亡人数分别达到1 930 万和1 000 万[1]。研究[2]表明转移和复发是癌症患者死亡的主要原因,血行播散则是癌症转移和复发的主要途径,因此检测循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)对癌症患者的转移和复发的预测及疗效监测具有重要的临床意义。CTCs 是由实体瘤脱落进入血液循环的肿瘤细胞,作为“液体活检”的主要标本之一,具有无创、便捷和可实时监测的特点,有助于实体瘤的早期检测与预后评估,在个体化治疗及疗效监测中具有重要临床意义[3]。然而,CTCs 数量十分稀少,从数以万计的血细胞中准确识别CTCs 成为了一项主要技术难题,极大阻碍其临床应用[4]。目前,联合多种上皮标志物及间质标志物检测已经成为提高CTCs 检出率的一个有效策略[5-6],但该策略存在特异性不足的问题。因此,迫切需要开发特异性高的标志物,方便实体瘤外周血的CTCs 的鉴定。
本研究利用肿瘤细胞与血细胞脂质代谢水平差异的特点,使用原位锁式探针杂交技术原位检测肿瘤细胞和白细胞(WBC)的脂代谢相关基因PRKAA2 的差异表达,为PRKAA2 用于CTCs 的鉴定提供可靠的理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞系人肝癌细胞HepG2,宫颈癌细胞Hela,胶质瘤细胞U87 和前列腺癌细胞PC⁃3 均购自上海中科院细胞研究所细胞资源中心。
1.1.2 主要试剂与仪器LightCycler 480 实时荧光定量PCR 仪(瑞士Roche 公司)、倒置共……
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