刘丽，郭骐源，郝建丽，郭丹丹，张雪梅，吴业红

长春生物制品研究所有限责任公司，吉林 长春130012

每年全球因季节性流感病毒感染会导致300万~500万严重的感染病例，死亡病例高达29万~65万例［1-2］。接种流感疫苗是预防流感最有效的措施［3］。传统鸡胚生产的流感疫苗，生产过程繁琐，培养的流感病毒抗原易突变，特别是当禽流感病毒引起流感大流行时，鸡胚的供应受到限制难以满足疫苗大量、快速生产的需求，应用细胞培养技术可克服上述困难。鸡胚生产流感疫苗的的下游工艺通常包括澄清、超滤和蔗糖区带离心［4］，此工艺对细胞培养中的关键杂质宿主细胞残留蛋白和宿主细胞残留DNA去除效果不理想。因此亟待开发出满足严格监管要求的细胞基质流感疫苗下游纯化工艺，以确保细胞培养生产流感疫苗的安全性和有效性［5］。层析分离通常被认为是大规模生产中最通用，最有效的一种方法。不断发展用于层析的材料能满足从实验室到商业规模的高容量和高扩展性的要求［6］，因此层析技术被广泛用于病毒的纯化［7］。由于传代细胞系的潜在致瘤风险，宿主细胞残留DNA通常选择核酸酶消化、离子交换层析等方法来进行有效去除［8］。新型复合填料Capto Core700具有未官能化的惰性外壳和位于核心的辛胺配基，使其具有分子排阻和离子吸附的双重功能［9］，非常适合宿主细胞蛋白与核酸酶的去除［10］。

本研究通过优化核酸酶处理条件、复合介质Capto Core700与强阴离子介质Capto Q的纯化条件，建立适于无血清悬浮MDCK细胞培养流感病毒的下游纯化工艺，为后续MDCK细胞流感疫苗的生产奠定基础。……