高永涛 白 浪 樊 华 刘 涛 姬 乐 雷 星 邓世波 袁江涛

结直肠癌(CRC)的进展和转移与肿瘤细胞的恶性生长、转移及凋亡减少有关，并且这些肿瘤细胞的生物学特性与基因调控有关，通过研究基因调控肿瘤细胞功能探讨肿瘤发生机制，对于分子靶向治疗肿瘤具有重要意义[1]。miRNA在疾病发生中发挥着重要作用，目前已知miRNA在心血管系统疾病、缺氧损伤中扮演着关键角色，miRNA还可作为疾病治疗的靶点[2]。miR-23a参与了细胞发育过程中的不同阶段，如细胞增殖、变异、凋亡等，对于骨骼肌和神经的发育起着重要作用[3-4]。近年来的研究表明，miR-23a与人类肿瘤关系密切，在许多肿瘤(胶质瘤、口腔鳞癌、胰腺癌)中发挥着促癌作用，靶向下调miR-23a的表达可抑制肿瘤的进展和转移[5-7]。既往研究显示，miR-23a在CRC组织中表达上调，并且具有促进CRC细胞增殖的作用[8]。目前对于miR-23a在CRC细胞凋亡及转移中的作用和调控机制尚不清楚，本研究以CRC SW480细胞作为实验对象，探讨在体外下调miR-23a表达对CRC细胞恶性表型的作用，为寻找有效的CRC分子治疗靶点提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

CRC SW480细胞购自微蒙生物科技(上海)有限公司；兔多抗[剪切的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(C-Caspase-3)抗体]、特殊富含AT序列结合蛋白2(SATB2)抗体购自美国Abcam公司；miR-23a抑制剂(inhibitor)、inhibitor对照(control)由吉满生物科技(上海)有限公司合成；Lipofectamine 2000转染试剂购自美国Invitrogen公司；基质金属蛋白酶-2(MMP-2)抗体购自美国Santa Cruz公司；荧光素酶报告载体由江苏凯基生物技术股份有限公司合成；miR-23a模拟物(mimics)和mimics control由苏州吉玛基因股份有限公司合成；……