李端,刘亚坤,段冰霞,杜娟,郭默然*

(1.河北医科大学第二医院,石家庄 050000;2.河北森朗生物科技有限公司,石家庄 050000)

成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)是一个多基因家族,在促进胚胎发育、组织修复、神经保护、肿瘤发生与转移等多种生理或病理过程中发挥作用[1]。FGFs共有23个成员,分子量在17×103~34×103之间,都具有120个氨基酸构成的保守核心[2]。根据序列同源性和系统发育上的差异,将这些家族分为包括旁分泌(FGF 1-10、16-18、20、22)、内分泌(FGF 15/19、21、23)和胞分泌(FGF 11-14)3种类型[3]。

FGF9作为其家族成员之一,广泛存在于在中枢神经系统及外周神经系统中,对神经元和神经胶质细胞有保护、促生长和修复损伤等作用[4]。少突胶质细胞作为神经系统的重要部分,在保护神经元、协助信号传递中发挥重要作用,FGF9也被证实可以调节少突胶质细胞中髓鞘相关蛋白的表达[5-6]。但是少突胶质细胞敲除FGF9是否对小鼠有明显影响还未见相关报道。

条件性基因敲除动物模型,是研究基因在模型特定细胞或组织生理功能的有效方法。其中基于Cre/Loxp系统的条件性基因敲除小鼠因其良好的实验效果得到了许多研究者的青睐[7]。为此,本实验利用Cre/loxp系统构建少突胶质细胞(Olig1)特异性敲除FGF9基因的小鼠模型,初步观察其表型,为进一步探讨FGF9基因在神经系统发育中的作用及机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

FGF9flox/flox纯合子转基因小鼠由本课题组委托百奥赛图基因生物技术有限公司【SCXK(京)2020-0007】制备。Olig1-Cre转基因小鼠(B6;129S4-Olig1tm1(cre)Rth/J)购自Jackson实验室(Stock No:011105)。本实验中共用FGF9flox/flox/Olig1-Cre+以及同窝对照雄性小鼠各16只用于实验,8周龄SPF级小鼠,体重约为25 g。……