郭亚净， 任 静， 刘 寒， 李亭亭， 王 洪

（河北中医学院中西医结合学院，河北石家庄050200）

脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）具有很高的死亡率和致残率，占所有卒中类型的15%~20%，且其发病人数呈逐年上升趋势［1］。并且，大多数幸存者会遗留不同程度的神经功能障碍［2］。大量研究表明，血脑屏障破坏、脑水肿、炎症反应和凝血酶毒性效应等继发性脑损伤是导致神经功能障碍，造成不良预后的主要原因［3-4］。

胱天蛋白酶1（caspase-1）作为炎症性半胱天冬酶，介导细胞固有免疫炎症反应，促进白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）和IL-18等炎症因子的成熟与释放。同时，caspase-1还能使细胞焦亡执行蛋白gasdermin D（GSDMD）发生剪切，并在细胞膜聚集，造成细胞穿孔，引起细胞焦亡［5］。实验研究显示，caspase-1介导的炎症反应和细胞焦亡参与多种神经相关性疾病的发展过程［6-10］。然而，其在ICH后神经损伤中是否起作用仍不十分清楚。

本课题组利用自体非抗凝血注射法制造大鼠ICH模型，采用脑室内注射caspase-1选择性抑制剂Ac-YVAD-CMK的方法，观察caspase-1介导的细胞焦亡在ICH后神经损伤中的作用。

材料和方法

1 动物

SPF级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，8~10周龄，体重约250~300 g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号为SCXK（京）2016-0006。饲养条件，温度恒定为（22±1）℃，湿度为（50±20）%，光照条件为昼夜各12 h，自由饮食、水。适应性饲养1周后，开始第1部分实验。将30只大鼠随机分为5组（每组6只大鼠）：假手术（sham）组、ICH 12 h组、ICH 24 h组、ICH 48 h组和ICH 72 h组。采用Western blot方法，观察caspase-1和GSDMD在ICH后的表达及激活情况，选取活化变化最明显的时间点。根据第1部分实验结果，采用同样的造模方式，开始第2部分实验：54只大鼠随机平均分为3组（每组18只大鼠）：sham组、ICH组和Ac-YVAD-CMK给药组（YVAD组），用于观察Ac-YVAD-CMK的作用。……