Prdx1基因敲减促进氧糖剥夺/复氧诱导的小鼠神经母细胞瘤N2a细胞凋亡*
2021-09-01王海鹏刘同帅张佳文王明山
王海鹏, 刘同帅, 于 群, 张佳文, 王明山△
(1青岛大学附属青岛市市立医院麻醉科,山东青岛266071;2潍坊医学院麻醉学院,山东潍坊261053;3南京医科大学青岛临床医学院,山东青岛266071)
脑血管疾病以其高致残率和高致死率病一直是危害我国中老年人身体健康和生活质量的主要疾病,其中以缺血性脑卒中为主,发病比例约占70%[1]。缺血脑组织恢复血液灌注后,原有损伤可进一步加重,称为脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reper⁃fusion injury,CIRI)。目前研究表明,活性氧(reac⁃tive oxygen species,ROS)形成是引起脑缺血再灌注后神经元损伤和死亡的重要机制之一[2-3],过氧化还原蛋白1(peroxirodoxin 1,Prdx1)作为抗氧化蛋白超家族中的一员,在细胞内参与ROS相关的多种信号通路的调节,发挥抗氧化和清除自由基的功能[4]。Wu等[5]研究表明,在大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注及离体大脑皮层神经元氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose depriva⁃tion/reoxygenation,OGD/R)模拟的脑缺血再灌注损伤模型中,Prdx1表达量皆显著上调。本项工作以小鼠神经母细胞瘤N2a细胞为研究对象,通过构建OGD/R模型模拟脑神经元缺血再灌注损伤过程,探讨Prdx1基因敲减对OGD/R诱导的离体小鼠神经母细胞瘤N2a细胞凋亡的影响及作用机制。
材料和方法
1 细胞株和主要试剂
小鼠神经母细胞瘤N2a细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司。高糖、无糖DMEM培养液及PBS磷酸缓冲液均购自武汉普诺赛生命科技有限公司;胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)购自BioInd;细胞增殖与毒性试剂盒(CCK-8)购自上海七海复泰生物科技有限公司;一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒及DAPI染色液均购自碧云天生物技术有限公司;……
