两种测定微生物生长速率的实验方法比较
2021-08-30赵旎,龙燕
检验医学与临床 2021年16期
赵 旎,龙 燕
武汉大学:1.实验室与设备管理处;2.武汉大学生命科学学院,湖北武汉 430072
检测微生物生长速率是微生物学和微生物检验实验教学中的重要内容,其在实际应用中也非常广泛,如耐药菌株的鉴定、抗菌药物的筛选等[1-2]。尽管目前实验教学中有多种检测微生物生长速率的实验方法[3],如克隆形成法、比色法、MTT法,但是在实际运用中均存在测定精度不高、实验成本高、实验时间冗长、容易造成样本污染等缺点[4-6]。因此,结合实验室的实际条件,找到一种适合所在实验室开展实验研究,既能提高实验精度,又能锻炼学生实验技能的可行性方案是非常有必要的。笔者在微生物检验实验教学实践中,结合本实验室实际情况,以酿酒酵母为实验材料,比较全自动生长曲线分析仪和多功能酶标仪两种检测酿酒酵母生长速率的实验方法,为本科生和研究生微生物检验实验教学提供借鉴。
1 材料与方法
1.1材料 野生型酵母菌株和对照组酵母菌株(对衣霉素敏感菌株)为本实验室保存,酵母膏胨葡萄糖(YPD)平板和YPD液体培养基按照文献[3]制备。
1.2仪器与试剂 全自动生长曲线分析仪(Bioscreen C,美国),多功能酶标仪(BioTek SYNERGY H1,美国),恒温摇床(博讯,中国)。
1.3方法
1.3.1实验材料准备 提前2 d把低温冻存的野生型酵母菌株、对照组酵母菌株通过划线的方法接种在YPD平板上。实验前1天晚上再分别挑取单克隆划线于新的YPD平板上。
1.3.2实验步骤 (1)在1.5 mL离心管中加入200 μL无菌双蒸水。(2)用无菌枪头在YPD平板上分别刮取适量酵母菌,放入步骤(1)的EP管中,充分混匀。……
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