朱舜华，李世宝,2△

1.徐州医科大学医学技术学院，江苏徐州 221000；2.徐州医科大学附属医院检验科，江苏徐州 221000

巨细胞病毒(CMV)属于疱疹病毒亚科,在宿主体内具有很强的潜伏能力[1]。根据宿主感染的时间可以分为先天性感染和获得性感染[2]。先天性感染主要是孕妇通过垂直途径感染新生儿[3]，会引起新生儿小头畸形，脑室肿大，肝脾肿大等疾病[4]。成人感染CMV一般无症状，当机体免疫力低下时可导致肺孢子菌肺炎等并发症[5]。目前临床检测抗体的灵敏度与特异度低，实时荧光定量PCR因其在检测中快速、高效特点在临床被广泛应用[6]。根据CNAS-CL36医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的应用说明，实验室开展新项目前需对所采用的商业检测试剂进行方法学性能验证，主要包括精密度、检出限、正确度、线性范围等[7]。因此，本研究对上海之江生物的CMV核酸(CMV-DNA)试剂盒进行性能验证，以期达到临床检测的要求。

1 材料与方法

1.1标本来源 CMV-DNA标本来自2020年6月1日徐州医科大学附属医院感染科。

1.2仪器与试剂 SLAN-96P荧光定量PCR仪。CMV-DNA测定试剂盒(批号P20191201)、CMV-DNA阴性血清对照品和CMV-DNA临界阳性对照品均购自上海之江生物科技股份有限公司。

1.3方法

1.3.1DNA提取与PCR反应 严格按照CMV-DNA测定试剂盒的要求进行。37 ℃ 2 min，94 ℃ 2 min循环一次；然后93 ℃ 15 s，60 ℃ 1 min，循环40次，单点荧光检测在60 ℃。PCR结果判读：仪器生成准曲线后，会自动显示定量值。当检测样本的检测值在[(1.00E+03)～(1.00E+07)]copy/mL范围时，测定结果有效。如果超过该范围可将其稀释后再进行测量。

1.3.2性能验证指标及验证方法