LncRNA CCAT1通过MAPK/ERK通路影响子宫内膜癌细胞的侵袭转移①
2021-08-23魏旭静路素双河北医科大学第一医院妇产科石家庄050000
李 林 魏旭静 路素双 刘 晶 (河北医科大学第一医院妇产科,石家庄 050000)
子宫内膜癌是常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,严重威胁女性患者的生命和健康。子宫内膜癌的病因和发病机制复杂,普遍认为子宫内膜癌的发生发展是多步骤多基因控制的复杂过程。子宫内膜癌的侵袭迁移能力严重影响患者预后,探讨子宫内膜癌细胞侵袭迁移的机制对改善患者预后具有 重 要 意 义[1-2]。 长 链 非 编 码 RNA(LncRNA)CCAT1 在多种恶性肿瘤中高表达,被认为是一种癌基因,CCAT1 在多种恶性肿瘤的侵袭迁移中也发挥重要作用[3-4],但CCAT1参与恶性肿瘤细胞侵袭迁移的机制复杂。MAPK/ERK 信号通路参与恶性肿瘤的侵袭迁移过程,MAPK/ERK 信号通路激活可促进恶性肿瘤细胞的侵袭迁移[5-6]。CCAT1 是否可通过MAPK/ERK 信号通路参与子宫内膜癌细胞的侵袭迁移尚不明确。本文对子宫内膜癌KLE 细胞中CCAT1 的表达以及沉默CCAT1 对子宫内膜癌侵袭迁移和MAPK/ERK信号通路的影响进行研究,探讨CCAT1在子宫内膜癌侵袭迁移中的可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料 人子宫内膜癌细胞系KLE 和正常人子宫内膜基质细胞系T-HESC(中国科学院上海细胞库);CCAT1 siRNA(CCAT1-siRNA)和 NC siRNA(NC)(广州博锐生物科技);Lipofectamine 2000 试剂盒(美国Invitrogen 公司);聚合酶链反应(PCR)试剂盒、逆转录(RT)试剂盒、Trizol 试剂、ECL 化学发光试剂盒(美国Sigma 公司);胰蛋白酶、DMEM 培养基、ERK 通路激动剂表皮生长因子(EGF)(美国BPB公司);兔抗人ERK 单克隆抗体、兔抗人p-ERK 单克隆抗体(美国Santa Cruz 公司);Transwell 小室(美国Corning公司);PCR扩增仪(美国Gibco公司)。
1.2 方法
1.2.1 实时荧光 RT-PCR 测定 KLE 和 T-HESC 细胞中CCAT1 水平 miR Vana miRNA 法分离两种细胞总RNA ,每组设7 个复孔,分光光度计测定RNA 浓度和纯度。……
