岳芳倩 邹有瑞 孙胜玉 王 哲 马 辉 （宁夏医科大学临床医学院，银川750004）

胶质瘤是人脑中最常见原发性神经恶性肿瘤，约占中枢神经系统原发恶性肿瘤的80%，由于其生长过程中浸润广泛，手术很难将其彻底切除，预后极差，病死率较高［1-3］。胶质瘤干细胞（glioma stem cells，GSCs）是一类具有自我更新、多向分化潜能且致瘤性极强的细胞亚群，近年研究表明，胶质瘤发生发展及不良预后可能与GSCs关系密切［4-5］。

胆碱激酶（choline kinase，CHK）是磷酸胆碱生物合成过程中起关键作用的酶类，有胆碱激酶α（choline kinase alpha，CHKA）和胆碱激酶β（choline kinase beta，CHKB）2 个亚型［6］。在体内，CHKB 仅具有乙醇胺激酶活性，而CHKA 兼具CHK、乙醇胺激酶双重活性，在功能方面优于CHKB，是胆碱激酶的优势亚型。近年研究显示，CHKA 具有癌基因特性，在多种恶性肿瘤中表达明显上调，是肿瘤发生发展机制中的重要因子［7］。课题组前期研究中也发现CHKA 参与胶质瘤恶性进展过程，与胶质瘤发生发展有关，但其影响胶质瘤发生发展的具体机制尚未明确，推测其可能与GSCs聚集与活性有关。本研究拟探究CHKA在不同细胞中的表达情况及其活性被抑制后GSCs 增殖、凋亡情况，初步探讨CHKA 与GSCs的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 人源性胶质瘤细胞株U87MG、小胶质细胞株HMC3（中国科学院上海细胞库）；DMEM、DMEM-F12、胎牛血清（美国Gibco 公司）；表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、B27因子（美国Invitrogen 公司）；胰蛋白酶和青霉素、链霉素（上海碧云天公司）；兔抗人CHKA抗体、鼠抗人Nestin 抗体、兔抗人 CD133 抗体、兔抗人 GAPDH 抗体（美国Abcam 公司）；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗、FITC标记的山羊抗兔二抗、Cy3标记的山羊抗鼠二抗（北京中杉金桥公司）；……